PEI沉淀法分级分离可溶性提取物实验

日期: 2024-05-25 23:05:08|浏览: 84|编号: 69448

友情提醒:信息内容由网友发布,请自鉴内容实用性。

PEI沉淀法分级分离可溶性提取物实验

聚乙烯亚胺沉淀法分离可溶性提取物的实验

材料和仪器 提取液[0.2%脱氧胆酸钠(DOC)上清液,见实验1,P.146~147] - 均质机(15-338-55) 硫酸铵(AMS) 试剂 聚乙烯亚胺(PEI)(10%原液,pH7.9) 缓冲液 A 缓冲液 A + 0.3 mol/L NaCl 缓冲液 A + 0.9 mol/L NaCl 二硫苏糖醇(DTT)(0.1 molVL)(配方,见“试剂配制”PP.I84~189) 步骤 1) 将0.75 ml 10% PEI 溶液添加到约24 ml 可溶性提取物(0.2% DOC 上清液)中,使 PEI 的最终浓度为0.3%。 混匀后,4°C 静置 15 分钟。方案补充实验:在加入 PEI 之前,取 0.2% DC 上清液,确定沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶所需的 PEI 量(参见第 174 页)。在加入 PEI 后... 阅读更多

蛋白质浓缩方法基础知识

蛋白质浓缩的基本方法有:丙酮沉淀;免疫沉淀;三氯乙酸沉淀;硫酸铵沉淀;(低温)有机溶剂沉淀;聚乙二醇沉淀;超滤;透析;离子交换层析和冻干……1.丙酮沉淀;三氯乙酸沉淀需要的仪器简单,但常常会导致蛋白质变性。2.免疫沉淀:需要特异性抗体!3.硫酸铵沉淀:采用高浓缩

蛋白质浓度(-)基本方法

蛋白质浓缩的基本方法有:丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯乙酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析法和冻干法…… 1.丙酮沉淀法;三氯乙酸沉淀法 该试验需要的仪器简单,但常导致蛋白质变性。 2.免疫沉淀法:需用特异性抗体! 3.硫酸铵沉淀法

聚乙烯亚胺的结构特征

聚乙烯亚胺(PEI)又称聚氮丙啶,是一种水溶性聚合物,为无色或淡黄色粘稠液体,有吸湿性,溶于水和乙醇,不溶于苯,商品化产品通常为20%~50%浓度的水溶液。

武汉物理与数学研究所揭示金纳米粒子对细胞代谢的影响

近日,中国科学院武汉物理与数学研究所中国科学院生物磁共振分析重点实验室生物医学代谢组学研究组在研究不同表面修饰的金纳米棒暴露对细胞代谢的影响方面取得新进展,相关研究成果发表在《先进医学材料》( )上。金纳米棒在细胞成像、药物输送和细胞治疗等领域具有广泛的应用。

西安交通大学雷波教授最新文章:发送miRNA调控干细胞分化

西安交通大学科研人员利用层层组装技术,在超小金纳米粒子表面构建脂质体和聚乙烯亚胺膜层,开发出一种新型非病毒基因递送系统。该系统具有细胞毒性低、能高效负载miRNA、防止miRNA酶降解、精准递送miRNA进入骨髓间充质干细胞、显著促进干细胞成骨分化等特点,在基因递送领域展现出良好的应用前景。该研究成果发表在Nano

蛋白质浓缩方法

丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯乙酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析法及冻干法…… 1.丙酮沉淀法;三氯乙酸沉淀法需要的仪器简单,但常导致蛋白变性。 2.免疫沉淀法:需用特异性抗体! 3.硫酸铵沉淀法:用高浓度盐沉淀蛋白(盐析)选择

蛋白质浓缩方法

蛋白质浓缩的基本方法有:丙酮沉淀;免疫沉淀;三氯乙酸沉淀;硫酸铵沉淀;(低温)有机溶剂沉淀;聚乙二醇沉淀;超滤;透析;离子交换层析和冻干……1.丙酮沉淀;三氯乙酸沉淀需要的仪器简单,但常常会导致蛋白质变性。2.免疫沉淀:需要特异性抗体!3.硫酸铵沉淀:采用高浓缩

苏州纳米所新型纳米药物递送系统研究取得系列进展

纳米药物递送系统是指通过物理或化学的方法将药物分子负载到纳米材料载体上形成的药物-载体复合体系,其主要优点包括:(1)显著提高靶区域药物浓度,从而提高药物的利用率和治疗效果,减少药物的不良反应;(2)提高难溶性药物在水溶液中的溶解度;(3)将药物分子递送至特定区域;

电子基础知识:各种电容器的识别

各种电容图1 图1为电子管电容。 图2为灯电容。 图3为MKPH电容。 图4为MET电容。 图5、图10为PEI电容,图6为电子管贴片电容。 图7为MPE电容。 图8为贴片电容。 图11为轴向电解电容。 图12为MPP电容。 各种电容图2 图1为PPN电容。 图2为PET电容。 图3为MET电容。

镍电镀废水处理-如何实现优化

电镀过程中产生的废水成分十分复杂,其中重金属废水是电镀行业最具潜在危害的一类废水。镍是一种致癌重金属,同时也是一种较为昂贵的金属资源(价格是铜的2~4倍)。电镀镍因其优异的耐磨性、耐腐蚀性、可焊性等特点,在电镀生产中得到广泛的应用,其加工量仅次于镀锌,在整个电镀行业中居第二位。

凝胶层析技术的主体-层析柱

凝胶是一种多孔性聚合物,每个粒子就像一个筛子,当样品溶液通过凝胶柱时,分子量较大的物质由于其粒径大于凝胶网眼,只能沿着凝胶粒子间的缝隙流动,随溶剂流动,因此流程较短,向前移动速度较快,优先流出柱外;相反,分子量较小的物质由于其粒径小于凝胶网眼,可以自由进出凝胶粒子网眼,并向下移动。

- 报告基因技术

报告基因技术 生物发光生物在自然界中分布广泛,包括细菌、真菌、鱼类、昆虫等。这些生物发光生物体内催化生物发光反应的各种酶称为荧光素酶(),底物命名为荧光素()。自1986-1987年首次作为报告基因使用以来,荧光素酶基因已

- 报告基因技术

报告基因技术 生物发光生物在自然界中分布广泛,包括细菌、真菌、鱼类、昆虫等。这些生物发光生物体内催化生物发光反应的各种酶称为荧光素酶(),底物命名为荧光素()。自1986-1987年首次作为报告基因使用以来,荧光素酶基因已

从盐湖卤水中提取锂的工艺方法有哪些?

主要的盐湖卤水提取技术有沉淀法(包括碳酸盐沉淀法、铝酸盐沉淀法、水合硫酸锂结晶沉淀法、硼镁硼锂共沉淀法)、煅烧浸出法、碳化法、溶剂萃取法、吸附法、电渗析法、膜分离法等。其中,溶剂萃取法尚未实现大规模工业应用。

改性PEG的使用介绍

聚乙烯亚胺在细胞培养中可以增强粘附性较弱的细胞的粘附性。PEI 是一种阳离子聚合物,细胞外表面带负电荷,粘附在覆盖有 PEI 的培养皿底部,使细胞与培养皿之间有更强的粘附性。但聚乙烯亚胺有较强的细胞毒性。聚乙烯亚胺是历史上继聚赖氨酸之后发现的第二种聚合物转染试剂。PEI 可以将 DNA 凝聚成带正电荷的颗粒。这些

™ 免疫共沉淀后用于IPWB实验的新型二抗溶液...

™ 免疫共沉淀后IP-WB实验验证的新型二抗溶液免疫共沉淀(Co-)是基于抗体与抗原的特异性相互作用研究蛋白质相互作用的经典方法。它是确定完整细胞中两种蛋白质之间生理相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下裂解时,

固相萃取与传统的液-液萃取和蛋白质沉淀相比有哪些优势?

与传统的液液萃取和蛋白沉淀相比,固相萃取有着无可比拟的优势,具体如下: 纯化方法:LLE(液液萃取) 优点:不需要特殊的设备 缺点:1、操作复杂,耗时长 2、需要大量的有机溶剂,成本高,且污染环境 3、难以从水中提取出水溶性强的物质 纯化方法:PPT(蛋白沉淀) 优点:操作简单,不需要特殊的设备 缺点:1、不

琼脂糖凝胶配方

琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为普通琼脂糖和经化学改性后熔点较低的低熔点琼脂糖。琼脂糖的熔点在62~65℃之间,熔化后在37℃下可保持数小时为液态,在30℃下凝固成凝胶。多用于凝胶中染色体DNA的原位酶切和DNA片段的回收。琼脂糖凝胶由于孔径较大,常用于大分子蛋白质和DNA的分离。

砂砾骨料加工(洗砂)系统中废水处理的三种常见用途......

砂石骨料加工(水洗砂)系统废水处理的三种常见处理工艺及其九个方面对比基础设施建设需要大量的砂石骨料,在砂石生产过程中,筛分、制砂等环节都会产生大量的生产废水,如果不经过处理直接排放,会对生态环境造成一定的破坏,本文分享砂石骨料加工系统废水处理的三种常见方法及其对比,三种常见方法介绍目前

实验室沉淀物基本介绍

沉淀剂(),利用沉淀剂产生沉淀,既可以分离液相中的物质,又可以把“旧”沉淀转化成新的沉淀。由于相对用量不同,有些试剂既可以作为沉淀剂,又可以作为络合剂。沉淀剂一般分为无机沉淀剂和有机沉淀剂两大类。用无机沉淀剂进行沉淀分离,其分离效果和选择性往往不如有机沉淀剂。常用的无机沉淀剂有:

聚乙烯亚胺技术参数

聚乙烯亚胺(PEI)又称聚氮丙啶,是一种水溶性聚合物,为无色或淡黄色粘稠液体,有吸湿性,易溶于水和乙醇,不溶于苯,市售产品通常为20%~50%浓度水溶液。技术参数HG-20聚乙烯亚胺的详细描述产品名称:聚乙烯亚胺含量:50%用途:碱

化学研究所气凝胶研究取得新进展

气凝胶是迄今为止已知的密度最小的合成材料之一,由于其极小的表观密度和热导率、较高的孔隙率和比表面积而受到广泛关注。然而气凝胶的多孔结构和极低的密度导致其力学强度较差。另外,常用的超临界干燥法制备工序复杂、周期长、产率低、成本高,制约了气凝胶的实际应用。

沉淀的概念,一种常用的分离方法

沉淀操作是将溶液中的目标产物或主要杂质以非晶态固相形式析出,然后分离的单元操作。沉淀方法有等电点沉淀法、盐析法、有机溶剂沉淀法等。

蛋白质纯化实验

不发生电泳。带负电荷的蛋白质粒子在电场中向负极移动。带正电荷的蛋白质粒子在等电点碱性溶液中向正极移动。蛋白质就能被分离纯化。这种现象叫做蛋白质电泳()。蛋白质分离纯化的一般原则 ①回收率高 ②纯度高 ③活性高 ④方便快捷 ⑤经济性 蛋白质分离纯化的一般步骤 ①

乙醇沉淀蛋白质的原理是什么?

蛋白质从溶液中沉淀出来的现象称为蛋白质沉淀。蛋白质沉淀的常用方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、重金属盐沉淀、生物碱试剂和某些酸(如三氯乙酸)沉淀等。乙醇沉淀蛋白质是蛋白质变性。盐析法是在蛋白质溶液中加入大量硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等中性盐,破坏蛋白质的水化膜,中和蛋白质的电性。

使用台式大容量离心机分离细胞的梯度介质和梯度类型

分离细胞的梯度培养基受很多条件的限制。理想的梯度培养基应满足以下条件:1.对细胞无毒。2.能形成具有足够密度的等渗介质。3.不会渗透到细胞内。4.分离后易于从细胞中除去。5.梯度粘度低。目前,用于分离细胞的梯度培养基主要有:

使用台式大容量离心机分离细胞的梯度介质和梯度类型

台式大容量离心机分离细胞的梯度培养基受很多条件的限制。理想的梯度培养基应满足以下条件:1.对细胞无毒。2.能形成具有足够密度的等渗介质。3.不渗入细胞内。4.分离后易于从细胞中除去。5.梯度粘度低。目前,用于分离细胞的梯度培养基主要有:

胆汁酸的临床意义概述

1. 肝胆疾病 2. 胃肠道疾病 3. 其他引起胆汁酸代谢改变的疾病 在研究各种疾病对胆汁酸代谢的干扰时,往往对生物标本进行严格分离,并采用色谱技术对每种胆汁酸成分进行详细研究。但在临床实践中,大多数情况下,如筛查肝脏疾病,只需要进行简单的酶法测定总胆汁酸水平。本章将重点介绍血液

从马铃薯中提取优质浓缩蛋白

硫酸铵沉淀法与等电沉淀法提取马铃薯浓缩蛋白的比较研究。图片来源:中国农业科学院。中国农业科学院农产品加工研究所马铃薯加工品质控制创新团队研究发现,硫酸铵沉淀法和等电沉淀法均能从马铃薯加工浆液中提取出具有良好功能特性、理化性质和营养品质的浓缩蛋白。相关论文发表在Jour

膜蛋白层析简介

CMP+ 是一种用于分离强疏水性蛋白质和多肽混合物的色谱系统。通常,去垢剂(如 SDS)溶解膜蛋白,形成 SDS 融合的膜蛋白,通过以羟基磷灰石为固定相的色谱柱进行分离纯化。羟基磷灰石色谱柱具有阴离子磷酸基团(P 端)和阳离子钙(C 端)。与固定相的结合主要取决于膜蛋白的大小和结合的 SDS 量。利用原子散射研究 cAMP

提醒:请联系我时一定说明是从浚耀商务生活网上看到的!