雷尼镍价格 C标记药物的制备及其质量控制

雷尼镍价格 C标记药物的制备及其质量控制

3H、14C等放射性标记药物在新药研究、药物残留分析等方面有着广泛的应用，是阐明药物代谢和处置过程的完美工具，还可用于解决生化研究[]、揭示生物合成途径[]、研究酶促反应机理[-]、阐明有机反应机理[-]以及环境科学研究。它是利用放射性核素3H、14C作为示踪剂，对研究对象进行标记和示踪的一种痕量定性定量分析方法，具有很强的定位和示踪能力，检测限很低。放射性同位素与自然界中相应的常见元素及其化合物具有相同的化学和生物学性质，但具有不同的核物理性质[]——放射性。因此，用放射性同位素作为标记物，制成含有放射性同位素的标记化合物分子，代替相应的未标记化合物。 利用放射性同位素能连续发射特征射线的核物理性质，利用放射性检测仪器和设备可随时示踪目标化合物()在体内或体外的分布位置、数量和代谢变化等处置特性。放射性标记和示踪方法已用于预测药物在体内处置的研究。常用的放射性同位素有14C、3H、32P、35S、125I、131I等，测量仪器和设备不同，14C、3H、32P可用液体闪烁计数器(LSC)检测，35S可用气体正比计数器(气体)检测，125I可用低能光子能谱(低)检测，131I可用高纯锗探测器(HPGe)检测[]。 新药临床试验和化合物体内命运研究最常用的标记物是14C，它广泛存在于有机化合物中（大多数有机化合物分子都有C原子），与其他放射性元素相比，在分子中形成的化学键稳定、安全，且半衰期较长，可获得较高的放射性比活度；另一种常用的标记物3H易于化学合成，价格相对便宜，易得，国内许多公司和研究机构都具备氚化合成设备和技术能力。如今，随着小型正电子发射断层扫描（PET）仪器的发展，利用11C、13N、15O、18F等放射性核素研究毒理学和药代动力学[机体对外源性化学物质的吸收、分布、代谢和排泄过程（ADME）][的例子越来越多。

新药研究所需的放射性标记药物的合成过程受多种因素影响，例如放射性同位素的来源、放射性标记药物的规格及其检测方法。放射性标记化合物的规格包括放射性同位素的种类、放射性剂量（放射性活度）、放射性比活度（比活度）、化合物分子结构中的标记位置、化学纯度和放射化学纯度（放射化学纯度）、剂量、给药方式、剂型和目标化合物的用途。放射性同位素的来源还可能受到多种因素的限制，例如使用期限、财务规划、实验室功能和设备、法律法规、实验室规章制度、放射性标记起始化合物、未标记起始物料（）、中间体、标准物质和与合成过程有关的产品的制备、处置和储存条件。

随着放射性检测仪器和设备的更新换代，放射性标记合成技术与检测方法取得了长足的进步。然而，在我国生命科学飞速发展的今天，其原料严重依赖国外试剂和药物供应商，同时存在标记合成研究方法落后、现代检测与确证方法应用普及率低、缺乏深入交流等问题。本文将阐述3H、14C标记药物的化学合成方法与制备策略，进而重点探讨3H、14C标记药物的质量控制，以3H、14C标记药物为例，阐述放射性标记药物最新的确证与检测技术手段，为新药研究和药物残留研究人员提供参考。

13H和14C标记药物的制备策略

放射性标记化合物的制备方法主要有非合成方法和化学合成方法两种[1]。非合成方法主要有同位素交换法和生物合成法，其他方法还有热原子反冲标记(热原子)、加速离子标记(离子)和辐射合成(2)。非合成方法一般具有操作简单的优点，适用于制备一些氚标记化合物。其缺点是通常事先不知道氚在标记化合物分子上的具体位置，得到的氚标记化合物比活度低、放射性杂质含量高，影响示踪研究的检出限、准确度以及体内外分布位置等。但采用非合成方法标记的放射性药物可以解决新药研发过程中临床前及临床研究前期的一些机理问题[2]。

化学合成的优点是放射性标记化合物的比活度和放化纯度较高，标记位置容易确定，因此是目前制备放射性核素标记化合物的最主要方法。缺点是制备工艺复杂，步骤多、流程长，成本较高。放射化学合成与普通化学合成有许多不同之处：首先，在原料的选择上，一般化学合成可以方便地选择各种原料和中间体，而放射性标记化合物只能使用简单的放射性前体（），如主要从反应堆中直接获得的14C和3H，主要包括氚气（3H2）、氚水（3H2O）、硼化钠（~）、锂铝氚（~）等[]，因此合成方法受到原料的严格限制； 其次，在设计合成路线时，除了考虑简便、快速外，还应尽量将放射性原料放在最后一步加入，提高放射性原料的利用率；另外，制备高比活度标记化合物时，往往需要特殊的微合成设备和分离纯化技术，并应避免高温、高压等剧烈反应，以减少放射性污染的可能性。放射性标记化合物的制备过程需经过合成工艺研究（确定合成路线和反应条件，并按路线和条件制备试剂和药物）、微合成改造等步骤，然后利用通过合成工艺研究和微改造获得的数据和操作经验，严格按照放射性反应操作规程，完全按照微改造步骤和操作方法，一次性制备出放射性标记化合物。下面主要讨论放射化学合成法。

1.1确定合成路线及反应条件

根据放射性标记药物的用途、用量、现有的实验条件等因素，参考原料的合成工艺，设计合适的放射性合成工艺路线。选择合成路线时，要求操作步骤少、时间短，力争在合成的最后阶段引入放射性标记原子，并进一步优化反应条件，提高产率。确定放射性药物更合理的制备路线和反应条件，应结合前人的研究成果、现有的相关文献报道和专利，遵循放射性化合物制备的基本原理。例如，斯琴朝克图（2011）[]在探索制备氚标记动物促生长药物赛多西汀（CYX）的合成路线时，设计并尝试了三种不同的合成路线。最后根据实验室条件和后续示踪试验的要求，选择合成路线I（见）作为最终的标记合成路线。该路线反应产率高，步骤少，操作简单，放射性废弃物少。 而且未标记的CYX稀释后得到的6-[3H]-CYX比活度高达39.94 mCi·mmoL-1，必要时其比活度还可以提高10倍以上。

图1 6-[3H]-CYX（A:(OCH3)2）合成路线（Ⅰ）

合成路线Ⅱ（见）的设计原则是，除了追求反应步骤简便、快速外，尽量将放射性原料放在最后一步加入，以提高放射性原料的利用率。此合成路线设计了6步反应，将引入氚原子的步骤设计在化学性质较为稳定的6-Br-2-甲基喹喔啉上。在合成反应的具体实施过程中，前三步反应较为顺利，得到了纯度较高的6-Br-2-甲基喹喔啉。但在用氚气催化6-Br-2-甲基喹喔啉氚化时，氚原子无法顺利引入，未能得到目标化合物6-[3H]-2-甲基喹喔啉。 此后，氚化反应步骤被推至上一步化合物4-溴-苯并呋喃（Br-BFO），但脱溴和氚化也未能成功，这条合成路线在多次尝试未达到预期目标后被放弃。

图2 氚标记CYX(T=3H)的合成路线（Ⅱ）

合成路线三（见）设计的前提是合成路线一被堵塞。对4-溴-2-硝基苯胺（4-Br-ONA）进行氚化时，其硝基还原总是快于脱溴，无法得到目标化合物4-[3H]-ONA。在暂时无法达到最终目的的情况下，将氚化反应向前推进一步，对结构更简单、化学性质更稳定的对溴苯胺进行氚化，避免硝基还原。然后对氨基进行保护，对4-[3H]-苯胺进行硝化、水解脱保护，利用ONA的升华性质，通过水蒸气蒸馏分离纯化[3H]-ONA。后续步骤与合成路线一相同，成功得到目标化合物6-[3H]-CYX。但该合成路线步骤多、流程长，产率低（2%~5%）。 在解决了合成路线I中遇到的困难后，该路线被放弃。

图3 CYX(T=3H)路线(Ⅲ)

在标记合成过程中，始终要探索更加合理、更加有效、更加经济的合成策略。等[]在早期报道的基础上，对11-[14C]-(氯氮平)的标记合成路线进行了修改和优化，结果表明反应时间缩短了60%，总收率由原来的6%提高到23%，取得了良好的修改效果。本实施例给出了11-[14C]-的合成路线及反应条件修改过程。本实施例表明合成路线设计的合理性直接影响反应收率，甚至影响目标产物的放化纯度和比活度。

a. SnCl2/HCl b. KOH/EtOH c. HCl/EtOH [3 步, 124 h, 23.27%] d. H2O2 30%, K2CO3/DMSO e. SnCl2/AcOH [2 步, 16 h, 77%] 图 4 原始合成路线 (a, b, c) 和修改后的合成路线 (d, e) 4 (a, b, c) 和 (d, e)

1.2 3H标记药物的非合成制备

在新药研究过程中，在进入临床前及临床研究阶段之前，通常可采用直接氚标记等非合成氚标记技术[1]。例如利用氚水、氚气、氚配合物以及新近发展的氚标记试剂等将氚原子直接引入目标化合物分子中，无需定域标记化合物即可得到简单的非定域氚标记目标化合物进行示踪研究。例如同位素交换法比化学合成法简单、经济、快速、有效得多。由于氚可以直接或间接地取代或添加到化合物中，不需要碳架合成，因此比14C标记化合物制备简单得多。一般的非合成标记方法有同位素交换、反冲原子法以及其他生化标记方法。

叠氮胸苷（AZT）是用于治疗艾滋病的药物。等[]利用同位素交换法制备氚标记的AZT用于临床前示踪研究，取得了良好的效果。研究表明，反应产率为20%～70%。本研究采用固、液同位素交换法，在氚气和氚水中催化AZT发生氢-氚交换反应，并详述了在不同催化剂、溶剂、pH、温度条件下的反应过程和反应产率。催化氚交换反应的条件参考和。

表格1

表1 不同溶剂和催化剂对液相中氚同位素交换的影响（氚-氚混合物（1:1 000），180 min，20 ℃）

催化剂

（）

溶剂

（）

副产品产量

（产率）/%

5% 钯/氧化铝

二甲基甲酰胺

50

5% 钯/硫酸钡

二甲基甲酰胺

四十五

5% 氧化钯/氧化铝

二甲基甲酰胺

40

5% 钯/氧化铝

二氧六环（

20

5% 钯/硫酸钡

pH 值 3.5

65

5% 钯/硫酸钡

pH 值 7.1

50

5% 钯/硫酸钡

pH 值 10.3

55

表1 不同溶剂和催化剂对液相中氚同位素交换的影响（氚-氚混合物（1:1 000），180 min，20 ℃）

表 2

表 2 用 DMF（180 μL）和三乙胺（10 μL）中的氚化水（10 μL，55 Ci·mL-1）进行同位素交换得到的氚化叠氮胸苷（2 μmol）3 2 个（2 μmol）与 DMF（180 μL）和（10 μL）中的水（10 μL，55 Ci·mL-1）进行同位素交换，3 小时

催化剂

（）*

温度/℃

Amol（氚水比活度百分比）

Amol（水）

5% 钯/氧化铝

100

0.15

5% 钯/硫酸钡

20

0.16**

5% 钯/硫酸钡

100

0.65

5% 钯/硫酸钡

135

0.81

*所有运行中催化剂的量均为 10 毫克（所有运行中均为 10 毫克）；**反应时间为 24 小时（时间 24 小时）

表 2 用 DMF（180 μL）和三乙胺（10 μL）中的氚化水（10 μL，55 Ci·mL-1）进行同位素交换得到的氚化叠氮胸苷（2 μmol）3 2 个（2 μmol）与 DMF（180 μL）和（10 μL）中的水（10 μL，55 Ci·mL-1）进行同位素交换，3 小时

等[]以氚水为氚源，在钯催化剂作用下，对溴氰菊酯（）、帕吉林（）、曲古霉素（）、环丙沙星（）、1,3-O-二苯甘油（1,3-O-）等6个化合物进行了氚化交换，并优化了反应条件，最终尝试用最近发展起来的固相反应——“电容模型”来解释氚标记特性和反应机理。5个化合物的氚交换反应条件及反应产率如图所示。

表3

表3 氚水中同位素交换氚标记（溶剂为二氧六环-Et3N，Pd催化剂）

化合物

（）

反应条件

（）

具体活动

(阿摩尔)/(席·毫摩尔-1)

屈服

（屈服）/％

环丙沙星（）

30分钟, 150℃

35.1

苄氧基丙酮（

60分钟, 115℃

59

50

曲古抑菌素

30分钟, 140℃

1.8

三十

溴氰菊酯 ()

20分钟, 140℃

9.3

三十七

氯菊酯 ()

20分钟, 140℃

表3 氚水中同位素交换氚标记（溶剂为二氧六环-Et3N，Pd催化剂）

生物化学法也是常用的非合成氚标记方法。其基本原理是利用生物体的代谢过程或某些生物活性物质(如酶)的催化作用，将已经氚化的中间体或起始原料()转化为所需的氚标记物质。例如，S-胸苷-L-[甲基-3H]-蛋氨酸(S--L-[-3H])的生物合成[]。热原子反冲标记法是利用核反应6Li(n,a)3H或3He(n,p)3H产生的氚原子的动能与有机分子反应，制备氚标记化合物。例如，将氨基酸与碳酸锂混合，密封于真空石英安瓿或铝容器中，置于反应器中，冷却并照射一定时间，放置数周后开封。 氚标记的氨基酸可以从辐照混合物中分离出来，由于核反冲得到的产物杂质多，比活度低，实用价值不大。

1.3 化学合成制备3H和14C标记药物

采用非合成方法获得氚标记产品存在一定的缺陷，如标记位置和标记量的不确定性，以及在体内易与体内氢原子交换，导致原药及其代谢物失去放射性等。在新药研究后期进行的ADME研究、代谢动力学研究和物质衡算研究中，需要对目标化合物进行准确的定性、位置和定量分析，因此标记药物采用稳定的位置标记化合物[]。位置标记是指通过化学合成方法利用3H或14C标记中间体或起始原料，在后续研究中将3H或14C原子标记在代谢稳定性强的母核基团C原子上，形成CH键(或CC等稳定键)，从而得到标记位置明确、化学性质相对稳定的目标化合物的一种化学合成方法。

1.3.1 催化氚加成制备3H标记药物

该化合物在催化剂存在下与氚气发生还原加成反应，如碳碳双键加成反应、碳杂原子双键加成反应等。在选择性5型磷酸二酯酶抑制剂SCH的氚标记合成研究中，任志强等[]以乙酸乙酯为溶剂，10%Pd/C催化剂催化合成其起始原料（1），在其母环2、3位碳碳双键上发生氚加成反应，得到氚标记前体（2）。再经过两步反应，得到高放化纯度（99.6%）、高比活度（693 mCi·mmol-1）的氚标记目标化合物[3H]-SCH（5）。合成路线如图所示。

NMP. N-甲基吡咯烷酮 (N-)DIPEA. 二异丙基乙胺() 图5 [3H]-SCH (5)的合成路线

1.3.2 催化氚交换制备3H标记药物

这是以氚气为氚原子供体，在催化剂作用下，将化合物上的功能基团与氚原子进行交换，从而得到氚标记化合物的方法。最常用的方法是催化氚-卤素置换法。在特异性抗疟药氯喹（）的氚标记研究中，Egan等[]以10%Pd/C为催化剂，以氚气为氚源，对碘化前体（1）进行碘-氚置换反应，成功得到了氚标记目标化合物[3-3H]（+/-）-氯喹（2），其比活度较高（1.07 TBq·mmol-1），符合动物实验的要求。氯喹的碘化前体（1）和氚标记目标化合物（2）的结构如图所示。

图 6 碘（1）和（2）的结构

还有少数氧原子、硫原子与氚原子的取代反应，虽然相关例子不多，但也是一种有效可行的氚标记合成方法。例如在抗组胺药盐酸盐N，N-二乙基-2-[4-(苄基)苯氧基]-乙胺（N，N--2-[4-(苄基)苯氧基]-乙胺）的氚标记合成研究中，发现N，N--2-[4-(苄基)苯氧基]-乙胺的含量最高，而N--2-[4-(苄基)苯氧基]-乙胺的含量最低。

图7 DPPE路线（*站点）

1.3.3 氚还原法制备3H标记药物

用氚标记的还原剂还原不同的化合物，得到相应的氚标记的目标化合物。氚标记的还原产物很少会出现同位素干扰、取代副反应等影响产品质量的因素，但反应中的溶剂或反应产生的水会引起同位素稀释问题，降低预期的比活度。此外，还可能出现同位素动力学效应（），使氚-氢取代反应过程中预期的放射性比活度降低[]。例如，氚标记的还原剂硼氚酸钠（）由于用途广泛、稳定，放射性比活度高（可达80 Ci·mmol-1），常被用作氚标记的还原试剂。1981年，等[]将比活度为48 Ci·mmol-1的硼氚酸钠用于合成氚标记的维生素D，成功得到了反应产物氚标记的维生素D，其比活度可达12 Ci·mmol-1。

氚化铝锂（）也是常用的氚化还原试剂之一，其还原能力比钠和硼氢化锂（氚）化合物强，能还原大多数相关基团。1974年，[]等利用氚化铝锂（）在前人工作的基础上合成了氚标记的亚油酸，得到了氚标记的目标化合物，其比活度和放化纯度均能满足后续实验的需要。研究结果表明，此氚标记方法可用于大多数D-或L-脂肪酸的氚标记合成，并可得到良好的结果，其合成路线如图所示。

图8 氚标记亚油酸的合成路线

此外，还有氚化锂（Li3H）、硼氚化锂（）、氚化铝锂（）、氰基硼氚化钠（）等氚化还原剂，可用于不同用途和性质的氚化还原合成反应。

1.3.4 利用小分子氚化前体制备3H标记药物

这是一种以商业化的氚化前体为起始原料或中间体，经过改造、合成、制备得到所需的目标氚标记药物的方法。常见的小分子氚化前体有氚化水(3H2O)、氚化二亚胺(3HN=N3H)、氚化碘甲烷(C3H3I)、氚化甲醛(3HCHO,)、氚化丙酮等。根据实验要求购买、定制氚化前体，或利用易得的氚源制备氚化前体，用于合成制备不同的目标化合物。氚化合成方法种类繁多，文献资料丰富，合成路线的选择也有其特殊性，例如抗艾滋病药物(SCH)就是CCR5拮抗剂，具有很强的有效性和选择性。Hesk et al. []以氚化水为氚化前驱体，制备了高比活度的氚化化合物[3H]-SCH，用于研究其受体结合性质，合成路线如图所示。实验结果表明，合成的[3H]-SCH的比活度为16.4 Ci·mmol-1，虽然达不到比活度预期值，但足以满足后续受体结合研究的需要。

图9 [3H]-SCH(4)的路线

1.3.5 14C标记药物的制备

14CO2是合成14C标记化合物最常用的起始原料，由催化反应得到，溶于氢氧化钠溶液中备用。目前商业化的14C起始原料大多是14CO2的衍生物，是所有14C标记化合物的共同14C供体，来源于核反应堆中的14N(n,p)14C反应，在一定的催化条件下(浓H2SO4或PbCl2)释放出14CO2，作为14C前体合成14C标记化合物[]。因此，可以认为是一种比较稳定的14CO2储存形式。各种14C标记起始原料或中间体的应用，主要取决于14C标记目标化合物的结构和合成路线的选择。 例如[14C]-甲酸（）、[14C]-甲醛（）、[14C]-碘甲烷（）、[14C]-硝基甲烷（）、[14C]-乙酸及其衍生物、卤素[14C]-乙酸盐、[14C]-丙酮、金属[14C]-氰化物、[14C2]-乙炔（H14C≡14CH）等都是14C标记化合物常用的起始原料。同位素标记合成14C标记化合物领域的文献较多，根据不同目标化合物的结构和后续研究的需要，反应路线的选择、合成反应条件及优化方法各有特点。

1,5-芳基-1,2,3-三唑（1,5--1,2,3-）类化合物均具有抗惊厥作用，其特性与苯巴比妥（镇静催眠药）、苯妥英钠等相似，其化学结构见图。等[]以K14CN为起始原料，进行14C标记合成1,5-芳基-1,2,3-三唑类药物，再经6步反应得到14C标记的目标化合物。反应产率高，比活度可满足后续生物示踪研究的需求。反应路线见图。

图10 1,5-芳基-1,2,3-三唑10的化学结构

a. CuSO4·5H2O，b. DMF c. Raney-Ni，HCO2H 75% d. EtOH/THF e. CH2N2，二恶烷（） f. KMnO4，n-Bu4N+Cl-，苯（），H2O

X. a: (CH3),b: (H) 图11 [14C]-1,5-芳基-1,2,3-三唑合成路线11 1,5--1,2,3-路线

此外，Hesk等[]以14C-甲醛（[14C]-HCHO）为14C源，进行了抗艾滋病药物（SCH）的14C标记合成，经过8步反应得到目标化合物[14C]-SCH，比活度为16.74 mCi·mmol-1（25.76 µCi·mg-1），放化纯度为99.2%，合成路线如图1所示。

图 12. [14C]SCH 马来酸酯（20）的合成路线

1.4 微合成改造

微合成改造的目的是为了得到高比活度的放射性标记化合物，以满足后续示踪研究的需要，并限制工作人员的放射性暴露和实验室的放射性污染。为此，将上述常规剂量合成步骤在完成后改造为微合成步骤，并优化每一步反应的产率，为下一步的放射性合成做好充分准备。放射性同位素标记药物实验的准备需要准确和细致，稍有疏忽或考虑不周，就会草草了事地进行正式的放射性试验（热试验），容易导致试验失败，浪费放射性起始材料和其他实验试剂、耗材，增加放射性废物，增加实验室放射性本底水平，使实验者受到不必要的辐射剂量。因此，模拟实验（冷试验）不仅可以检查热试验所用的设备和药物是否合格，还可以培训操作人员，确保正式实验能够顺利进行。 由于放射性标记化合物具有许多特殊的性质，其制备也有许多特殊的要求。制备放射性化合物的原料，如14C、3H等，来源难、价格昂贵，在制备过程中必须充分利用。标记率要尽可能高，未标记的放射性核素要尽量回收。标记、分离、鉴别等过程均需采用痕量或超痕量技术。操作过程中，应尽量减少放射性核素的稀释，避免引入不必要的载体。

放射性标记药物的剂量和比活度可能直接影响示踪试验的成败。其反应路线的微合成改造不仅要考虑示踪试验药物的剂量，还要考虑仪器的检测限。因此，在避免自身放射分解的条件下，目标标记化合物的比活度越高越好。比活度高的可以与非标记药物混合稀释，如果比活度低于药物条件，则意味着整个实验的失败，并且不可逆转。微合成改造过程中合成路线的合理性、投料量大幅度降低后反应条件的改变、最终产品的分离纯化等都需要重新调整和优化。 例如，在上述微观合成的修改过程中，准备标记的奎诺唑啉，三个步骤反应的最后一步（6- [3H] -CRYX反应的合成）主要是从三个方面优化的：饲料量，分离剂量，分离和纯化的屈服和奔跑的效果和台词，以及奔跑的效率和特定性，均与奔跑的效率高符合示踪剂测试条件的活性在图中显示了详细的优化数据。

表4

表4及以下为6- [3H] -CYX的水平

化合物和反应条件

（ 和 ）

一般合成条件

（）

微型合成条件

（-）

[3H] -FQDDA

5.9 克

10毫克

甲醇（甲醇）

125 毫升

120μl

浓盐酸

30 克

70 微升

氰基乙酰氢嗪（）

4.9 克

10毫克

反应堆（）

500毫升四颈瓶

2毫升微反应小瓶（2 mL）

反应温度（）/℃

25-30

25-30

反应时间（时间）/h

注意：[3H] - -1,4-Dioxo-2-辅助甲醛二甲基乙酰基（[[3H] -FQDDA）[2---1,4--（[3H] -FQDDA）]

表4及以下为6- [3H] -CYX的水平

NADPH是研究NADP+依赖性酶的重要物质。基于早期文献报告[]与早期的研究报告相比，二核苷酸（R- [4-3H] -NADPH）不仅反应途径较短，产量显着增加，产品纯度相对较高，而且标记的合成规模也大大降低了，而且产品的特定活性也更高。 h）可以达到25 CI·MMOL-1，它更适合作为其相关衍生物的三标记合成的起始材料。 综合途径显示在中。

图13 [2-3H] -IPROH和R- [4-3H] -NADPH的合成途径

1.5放射性标记药物的分离和纯化

放射性同位素标记的药物的分离和纯化方法比普通化合物的药物要复杂得多，所使用的试剂和药物的量比普通化合物的合成量表要小得多。通过分离和纯化过程中的自辐射。 FC），制备径向流色谱法（流动，RFC）和薄层色谱法（TLC）。 For , when [] the drug (11-[14C]-) by 14C , gel was used to and the of all three steps, and the 67.3%, 89.6%, and 86.0%, . The of the met the needs of . [] used HPLC to the main when the for - NADPH. The HPLC of the [2-3H]-iPrOH () that the peak at 5 min was [3H]-H2O ( for 19% of the total ); the peak at 15.5 min was [2-3H]-iPrOH ( for 81% of the total ), which was used in the next . 用于合成的R- [4-3H] -NADPH的反应混合物的放射性HPLC光谱表明，5分钟时的色谱峰为[3H] -H2O；总的放射性）和与R- [4-3H] - NADPH的色谱峰相对应的26分钟（）的流动相位分数（），以获得高纯度和高放射性纯度的目标化合物。 []使用微合成方法来制备挥发性酰基氯化物化合物（，14c-酸）和真空转移（）分离技术在过程中净化中间体和最终产物，而无需进一步分馏（）方法。

图14 [2-3H] -IPROH和[3H] -SCH（4）反应混合物的HPLC

对于毫克级放射性标记的药物的分离和纯化，除了上述仪器分析方法外，还可以使用更简单，更实用的化学分离方法，例如重结晶和提取。

23h和14c标记为药物的质量控制

在新药研究过程中的药物处置研究，例如体外代谢研究，材料平衡研究，兽药残留研究和食品安全性研究中的农药残留物，放射性治疗药物和其他药物研究过程和其他用于放射性同位素的质量分析的质量质量质量分析，这些质量质量均具有量化的质量。 IVE药物，化学纯度，放射性，放射化学纯度，放射性特定活性以及放射性同位素的标记位置的确定[]。

2.1结构识别

放射性标记的化合物在其结构中具有放射性同位素，因此它们的结构鉴定也不同。普通化合物的常用方法包括磁共振光谱（NMR），包括1H-NMR和13C-NMR，包括几乎可以为3H和14C标记的化合物提供的化学方法。 2D-NMR可以提供更完整的相关化学结构信息。 ，分析和判断由同位素引起的化学结构信息的潜在变化以及非放射性元素之间的差异。

It be that the time used in is not used in the of , and can only be used as a basis. The time of will more . This is the group () []. 4 When the CH2H4 folic acid () is with the HPLC , the UV the .

图15 h hplc氚CH2H4叶酸反应混合物的放射性光谱15 ch2H4的HPLC

2.2化学纯度检测

放射性化合物的化学纯度与普通化合物相似。 LED在溶液中，分解恶化可能是由其自身的放射性辐射引起的。

2.3辐射活动和比率检测

放射X型（）是指1960年代后的放射性元素或同位素衰减的数量。还可以添加以提高检测效率，此外，作为具有广泛应用前景的技术手段，加速器质谱（质量，AMS）。

放射性比率（，SA）是指化合物的质量的放射性活性（例如MCI·MG-1），或者是指每个摩尔（或MOL）物质的放射性活动（CI·MMOL-1或MCI·MMOL-1）。材料也可以反映用于纯化纯度计算的化合物。

在碳催化剂的作用下，更典型的例子使用汤来合成与抗受体的结合点密切相关的the胶（[3H] -DPPE）。 H 3H-NMR测量结果为30.7 CI·MMOL-1和30.3 CI·MMOL-1，LSC测量结果为37.7 CI·MMOL-1。

表 5

表5基于NMR数据[3H] DPPE比率表5 SA的[3H] -DPPE基于NMR数据

分子

（）

点值（值）

痣的价值

[A]

[B]

[A]

[B]

-ct2

550

575

275

288

-cth

502

554

502

554

-ch2

416

459

+208

+230

985

1072

计算（）：

$ {\ rm {s}} {\ rm {.a}} \ left [{\ rm {a}} \ right]：\ frac {{275} {{985} \ }}} \ times 28.75 + \ frac {{208}}} {{985}} \ times 0 = 30.72 {\ rm {ci}}} \ cdot {\ cdot {\ rm {mmo {mmo}}}

$ {\ rm {s}} {\ rm {.a}} {\ rm {。}} \ left [{\ rm {b}} \ right]：\ frac {{288} } {{1072} \ times 0 = 30.32 {\ rm {ci} \ cdot {\ rm {mmo} {{\ rm}}}}}}}}}

[a]：1H木偶3H-NMR图（来自1H 3H-NMR）

[b]：抗门控制1H速度3H-NMR tog（来自门控1H 3H-NMR）

表5基于NMR数据[3H] DPPE比率表5 SA的[3H] -DPPE基于NMR数据

2.4功率纯度检测

放射性化学的放射性化学（纯度，RP）的纯度是指放射性样品中放射性样品中总射线品的百分比。

纯化纯度=（特定化合物的放射性活性/样品的总放射活性）×100％

放射性均匀化合物的纯度通常与放射性薄层组合（Radio-TLC）方法或高效的液相色谱和放射性探测器组合（HPLC-LSC）一起使用，并且在线检测方法很简单，但是可以使用纯粹的射击。

图16 [14C] - 荧光放射性薄层扫描图16 [14C] -

HPLC-LSC方法是在某些条件下使用HPLC分离化合物，并使用在线放射性检测器检测来计算目标化合物在总放射活性的比例中，当总辐射活性的比例等于[]时，当[]与nAdph相同时，将nAdph与nAdph相分析，然后将H netc （HADC）与（HADC）分开。 ED，纯化纯化超过99.2％。

图17纯化后，r- [4-3H] NADPH的HPLC色谱图17 R- [4-3H] NADPH的HPLC

Siqin []在制备氚喹喹喹喹喹喹喹喹喹喹喹喹喹喹喹使用人工收集和分数检测方法的方法是计算产品的纯化的方法，结果表明纯化纯度超过99.0％。

图18分离和纯化的[3H]晶的HPLC -LSC色谱图18 HPLC [3H] -CRYX

2.5标记位置的确定

放射素在药物分子上的标签直接影响了痕量研究中双键在额定值中的痕量研究。标签合成。

图19 [3H] -SCH合成路线19 [3H] -sch

如图

此外，Filer等人的标记合成了多巴胺受体的配体的相应标记物质。

图21 （1）及其溴化物（1a），（1B）结构21 of（ - ） - （1）及其Oromo（1a），（1b）

图22 [3H] -NMR（CD3OD）图22 [3H] -NMR（CD3OD）1B

3结论

放射性的杀人案跟踪方法在医疗领域被广泛使用，并且它的发育非常快。 ，合成制备方法已经讨论了正在使用和开发的详细和检测方法的3H和14C标记药物的质量控制方法，并解释了相关的研究方法和应用方法。

[谢谢：本文在由毛金（Mao ）教授主持的国家自然科学基金会（）的支持下完成。