高含量纳豆激酶的纳豆冻干粉的制备方法.pdf
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1.(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公开号 (43)申请公开日 (21)申请号 2.0 (22)申请日 2019.01.25 (71)申请人新博广赛(广东)生物科技有限公司地址：广东省广州市从化区明珠工业园兴业路1号 (72)发明人：李莉、吴建 (74)专利代理机构：广州智顺知识产权代理有限公司（普通合伙）44401代理人：彭志坚 (51)国际 A23L 11/00 (2016.01) (54) 发明名称：一种高含量纳豆激酶冻干纳豆粉的制备方法 (57) 摘要：一种高含量纳豆激酶冻干纳豆粉的制备方法。
2、制备方法：1）处理液浸泡、蒸煮：以大豆为原料，放入含有NaCl的醋酸水溶液中浸泡6-10小时，浸泡时温度控制在20-25，然后放入灭菌器中110℃蒸煮10分钟，粉碎；2）接种：25-30℃接种纳豆枯草芽孢杆菌（-），纳豆菌接种量为3个；3）发酵、冻干粉：接种后，在30-37℃培养发酵20-24小时，将得到的发酵产物真空冷冻干燥，得到纳豆冻干粉。 本发明所述的高纳豆激酶含量纳豆冻干粉的制备方法，制备出的纳豆冻干粉中纳豆激酶的含量较高，且纳豆冻干粉的稳定性也较好。权利要求书第1页。
3.说明书，第3页 CN A 2019.04.19 CN A 1.一种高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法，其特征在于： 1)处理液浸泡、蒸煮：以大豆为原料，放入含有0.1-0.5NaCl与0.1-0.3乙酸的水溶液中浸泡6-10小时，浸泡时温度控制在20-25，然后放入灭菌器中110蒸煮10分钟，粉碎； 2)接种：在25-30接种纳豆枯草芽孢杆菌(-isl natto)，纳豆接种量为3； 3)发酵及冻干粉：接种后，在30-37℃培养发酵20-24小时，所得发酵产物经真空冷冻干燥即得。
4.纳豆冻干粉。2.根据权利要求1所述的高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法，其特征在于：1)处理液浸泡、煮沸：以大豆为原料，放入含有0.2-0.4NaCl和0.15-0.25乙酸的水溶液中浸泡7-9小时，浸泡时温度控制在20-25，然后放入灭菌锅在110℃煮沸10分钟，粉碎；2)接种：在25-30℃条件下接种，纳豆菌接种量为3株； 3)发酵及冻干粉：接种后，发酵培养，在30-37℃下发酵20-24小时，将得到的发酵产物真空冷冻干燥，得到纳豆冻干粉。3.根据权利要求2所述的高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法，其特征在于：步骤1)中，浸泡大豆的水溶液中含有。
5、0.3NaCl和0.2乙酸。4.如权利要求3所述的高纳豆激酶含量冻干纳豆粉的制备方法，其特征在于：步骤2)中的接种温度为27℃。5.如权利要求4所述的高纳豆激酶含量冻干纳豆粉的制备方法，其特征在于：步骤3)中的发酵温度为35℃。6.如权利要求4所述的高纳豆激酶含量冻干纳豆粉的制备方法，其特征在于：步骤3)中的发酵时间为22小时。权利要求1/1 Page 2 CN A 2 一种高纳豆激酶含量冻干纳豆粉的制备方法技术领域0001本发明属于纳豆粉加工领域，具体涉及一种高纳豆激酶含量冻干纳豆粉的制备方法。 背景技术0002 纳豆，起源。
6、我国古代自秦汉（公元前221年-公元220年）开始生产。大豆经纳豆芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌）发酵制成豆制品，性味粘稠、臭、微甜，不仅保留了大豆的营养价值，富含维生素K2，提高蛋白质的消化吸收率，更重要的是发酵过程产生多种生理活性物质，具有溶解体内纤维蛋白等生理功能的保健作用。富含各种营养成分，经常食用可预防便秘、腹泻等肠道疾病，增加骨密度，防止骨质疏松，还可以双向调节血压，溶解陈旧性血栓斑块，调节血脂，消除疲劳，全面提高人体免疫力。 0004 纳豆激酶是由纳豆芽孢杆菌产生的一种碱性丝氨酸蛋白酶，具有强效的血栓溶解作用。
7、固态发酵法生产纳豆激酶工艺简单，操作方便，可直接分解血栓，成本低廉。另外，纳豆激酶对血栓的作用时间长达8-12小时，而尿激酶的作用时间仅为30分钟。同时，尿激酶只能注射，而纳豆激酶可以注射或口服，并可在毛细血管中发挥作用。传统的溶栓酶如尿激酶、纤溶酶原激活剂（tPA）、链激酶等半衰期短、副作用大、价格昂贵、口服利用率低。纳豆激酶因具有口服、安全、高效、持久、成本低等优点，成为近年来溶栓产品开发的热点。 0005 目前主要的问题是传统发酵方法生产的纤溶酶普遍酶活力较低，大大影响了其推广应用和使用。
8.使用效果。发明内容 0006综上所述，本发明的必要性在于提供一种高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法，能够在短时间内制备出高含量纳豆激酶纳豆冻干粉，酶活力高，纳豆激酶酶活力稳定性较高。0007一种高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法，00081）处理液浸泡煮沸：以大豆为原料，在含有0.1-0.5NaCl和0.1-0.3乙酸的水溶液中浸泡6-10小时，浸泡时温度控制在20-25，再在杀菌锅中110煮沸10分钟，粉碎； 0009 2)接种：在25-30℃接种纳豆枯草芽孢杆菌（subti）。
9、l-isl纳豆），纳豆菌的接种量为3；00103）、发酵及冻干粉：接种后，进行发酵培养，在30-37℃下发酵20-24h，将得到的发酵产物真空冷冻干燥，得到纳豆冻干粉。0011优选的，所述高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法：00121）、处理液浸泡、蒸煮：以大豆为原料，在含有0.2-0.4NaCl和0.15-0.253CN A3的酸性水溶液中浸泡7-9小时，浸泡时的温度控制在20-25℃内，然后放入灭菌锅在110℃下蒸煮10min，粉碎； 0013 2)、接种：在25-30条件下接种，纳豆菌接种量为3；。
10. 0014 3)发酵及冻干粉：接种后，进行发酵培养，在30-37℃下发酵20-24小时，将得到的发酵产物进行真空冷冻干燥，得到纳豆冻干粉。 0015 其中，优选地，所述步骤1)中，浸泡大豆的水溶液中含有0.3NaCl和0.2乙酸。 0016 其中，优选地，所述步骤2)中的接种温度为27℃。 0017 其中，优选地，所述步骤3)中的发酵温度为35℃。 0018 其中，优选地，所述步骤3)中的发酵时间为22小时。 0019 与现有技术相比，本发明所述的高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法，制备出的纳豆冻干粉中纳豆激酶的含量高，同时还含有其他酶产品中的多种功能成分，显著提高了纳豆冻干粉的营养健康性。
11.值，而且纳豆冻干粉的稳定性也更好。 具体实施例0020 下面结合一些具体的实施例对本发明作进一步的说明，具体实施例是为了进一步详细说明本发明，并不旨在限制本发明的保护范围。0021 本发明实施例中所采用的原料均为市售的。0022 实施例1 0023 一种高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法，0024 1)、处理液浸泡、煮沸：以大豆为原料，在含有0.3NaCl和0.2的乙酸水溶液中浸泡8小时，浸泡时温度控制在20-25，再在灭菌器中110煮沸10分钟，粉碎； 0025 2)、接种：在25-30℃条件下接种纳豆枯草芽孢杆菌(-isl)。
12、纳豆），纳豆菌接种量为3；0026 3）、发酵及冻干粉：接种后进行发酵培养，在30-37℃下发酵22小时，将发酵产物真空冷冻干燥，得到纳豆冻干粉。0027 实施例2 0028 一种高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法，0029 1）、处理液浸泡及蒸煮：以大豆为原料，在含有0.5NaCl和0.1的乙酸水溶液中浸泡8小时，浸泡时温度控制在20-25℃内，然后放入灭菌锅在110℃下蒸煮10分钟，粉碎； 00302）、接种：在25-30℃条件下接种纳豆枯草芽孢杆菌（-isl natto），纳豆菌接种量为3；00313）、发酵、冷冻干燥。
13、制粉：接种后在30-37℃条件下发酵22小时，将得到的发酵产物真空冷冻干燥，得到纳豆冻干粉。0032 对比例1 0033 一种高含量纳豆激酶纳豆冻干粉的制备方法，0034 1)处理液浸泡、蒸煮：以大豆为原料，放入含0.3NaCl的水溶液中浸泡8小时，浸泡过程中温度控制在20-25℃内，然后放入灭菌锅在110℃条件下蒸煮10分钟，粉碎；0035 2)接种：在25-30℃条件下接种纳豆枯草芽孢杆菌(-isl natto)，纳豆菌接种量为3株； 使用说明 2/3 Page 4 CN A 4 0036 3)发酵及冻干粉：接种后，将混合物于30-接种。
14、37发酵22h，将发酵产物真空冷冻干燥，即得纳豆冻干粉。0037试验0038将新鲜制备的纳豆冻干粉样品与生理盐水按质量比1：6混合，静置4h，离心后取上清液，即得纳豆激酶粗提液。准确量取适量，用生理盐水稀释5倍，得到供试品溶液。通过吸光度试验测定纳豆激酶的含量。0039对纳豆冻干粉的大豆异黄酮进行检测，结果列于下表。 0040将纳豆冻干粉在4℃下贮藏10天、15天、30天，分别以T1、T2、T3测定纳豆激酶及活性，列于表1。0041表1实施例与对比例纳豆激酶微胶囊性能测试0042实施例1实施例2对比例1纳豆激酶含量。
15.含量/(u/mL)0.18350.17980.1365大豆异黄酮/(mg/100g)纳豆激酶活性T1(IU/g)2纳豆激酶活性T2(IU/g)0纳豆激酶活性T3(IU/g)0043本发明的制备方法，在浸泡大豆时加入醋酸，大大缩短了浸泡时间和发酵时间，同时得到纳豆激酶含量高的纳豆冻干粉，其稳定性也高。0044以上所述仅为本发明的一种实施例，并不限制本发明的专利范围，凡利用本发明说明书内容所做的等效结构或等效工艺变换，或直接或间接地运用在其他相关技术领域中的，也包括在本发明的专利保护范围内。说明书3/3页5CN A 5.