用于促进畜牧场动物生长的合成的促生长素抑制素免疫原的制作方法

用于促进畜牧场动物生长的合成的促生长素抑制素免疫原的制作方法

专利名称：一种促进畜牧场动物生长的合成生长抑素免疫原的制备方法

技术领域：

本发明涉及用作免疫原以促进饲养场动物生长的肽组合物。本发明的组合物的免疫原性肽含有辅助T细胞表位(Th)，其含有多种II类MHC结合基序，并且在其C末端或N末端具有生长抑素(生长促进激素) 。抑制素）。该肽任选地包含充当通用免疫刺激剂的感染素结构域。辅助 T 细胞表位和感染素结构域可实现针对生长抑素自肽的免疫反应。

主要的生长激素有生长激素（GH）、生长调节素-C（胰岛素样生长因子1，IGF-1）、生长激素释放因子（GRF）和生长抑素（促生长激素）。抑制素）（生长激素释放抑制剂）。生长激素的主要可能应用是在生长和哺乳中，然而，这些现象的激素控制依赖于许多不同激素之间复杂的相互作用（Prod Sci，1985，12：31）。因此，简单应用单一激素可能不足以提高生产力。

GH 可能扮演两种不同的角色。它在刺激肌肉蛋白质合成增加（大多数（如果不是全部）由 IGF-1 介导）方面表现出积极作用，同时由于其分解脂肪的能力而具有有效的分解代谢作用。综合作用是增加胴体瘦肉、减少胴体脂肪、普遍促进生长并普遍提高食物转化效率（以及，自然科学进展，1990；49：459；和Nutr，1987；27(2B)：581 ）。

GH给药的促生长作用在实践中并不可靠；外源激素的施用可能忽略了各种激素之间的敏感相互作用，并且忽略了接受人群血浆水平升高的可能影响。有效使用 GH 需要频繁注射，以提供持续生理有效的激素血清浓度。它增加了这些平衡的相互关系被破坏和产生不利影响的风险。

因此，虽然可以通过重组DNA技术大量生产生长激素的纯化制剂，但该技术并没有提供理想生长效果所需的递送调节机制。此外，重组生长激素在食肉动物中的使用，以及最近在奶牛中的使用，导致了消费者的广泛反对和协调障碍。使用生长激素促进反刍动物和其他饲养场动物的瘦体重积累尚未得到欧洲经济委员会的协调。协调和政治局势类似于应用IGF-1或GRF促进饲养场动物物种的生长。

作为增加生长刺激激素水平的替代方案，已证明可以同等或更有效地去除内源性生长抑制物质。总肉生长的主要抑制物质是生长抑素。生长抑素是一种由十四个氨基酸组成的环肽，其结构在物种间是保守的。它被合成为九十二个氨基酸的生长抑素原分子，已知六种肽来源，包括生长抑素本身和二十八个氨基酸形式的生长抑素。关于前生长抑素分子（J Lab Clin Med，1987；109：320）。生长抑素抑制一些胃肠道激素的释放，以及生长激素、胰岛素和甲状腺激素的释放，从而影响动物吸收营养物质并随后引导这些营养物质进入组织生长的能力。

在大鼠中应用生长抑素拮抗剂被发现可以刺激其生长（eta1.，生命科学（Life Sci），1985，37：27），但这种治疗也存在需要每天注射GH和IGF-1以及GRF的缺点。一种实用的选择是利用免疫反应来诱导生长抑素的免疫中和。应用免疫系统促进生长可能比直接施用激素或合成代谢类固醇更容易被消费者和协调机构接受。首先通过绵羊疫苗进行生长抑素的免疫中和( , 1983, 10:469)。

在一项使用圣基尔达双胞胎羔羊的初步研究中，主动免疫生长抑素导致治疗羔羊的生长速度是对照羔羊的 176%（等人，Anim Prod，1981，32：376）。随后的研究无法复制结果，但增长率普遍提高了15-20%。所有牧草动物物种中的生长抑素分子都是相同的，并且针对生长抑素的主动免疫已被证明可以刺激商业上重要的绵羊（等人，Prod Sci，1983，10：25；等人，加拿大动物科学杂志（Can J Anim Sci), 1986, 66: 77)、牛（等人，加拿大动物科学杂志 (J Anim Sci), 1986, 63: (Suppl) 215)、猪和鸡（等人，Dom Anim, 1986） , 3:55) 喂养生长。表 1 概述了证明牧草动物针对生长抑素的有效免疫的成功实例。

除了刺激生长速度和减少 20% 的饲养时间 (, , 1987;27(2B):581) 外，针对生长抑素的主动免疫对食物转化效率也有有益影响。除了因为动物生长更快而节省食物外，它们实际上在生长过程中更有效地利用食物（等人，Prod Sci，1983，10：469），至少部分是由于肠道蠕动的变化（等人， J Anim Sci，1985，61：234 等人，加拿大动物科学杂志，1985，64（补充）93）。该处理对屠体成分没有任何显着影响（等人，1983，同上），但值得注意的是，当杀死相同重量的动物时，处理过的动物可能会更瘦。综合所有实验数据，主动免疫可能是促进生长的更强大、更安全、更有效的工具（Dom Anim，1986，3：55）。

文献中已经报道了几种免疫原性形式的生长抑素的设计和实验。例如，生长抑素与蛋白质载体缀合以增强免疫功效。然而，蛋白质载体太昂贵，无法经济地用于牧草动物。此外，生长抑素的有效免疫取决于生长抑素和载体的结合位点。大多数（如果不是全部）生长抑素蛋白载体缀合物是使用载体蛋白上生长抑素和赖氨酸残基之间的戊二醛偶联交联来制备的。用于缀合生长抑素的两个赖氨酸存在于12聚体功能环中，因此当该缀合物用作疫苗时，可能会导致天然生长抑素结构的显着损失和生长抑素交叉反应性的降低。

此外，将蛋白质附着在生长抑素上是有问题的，因为大多数免疫反应是针对载体而不是生长抑素（载体分子的质量远大于生长抑素分子的质量），并且使用抗原半免疫-载体缀合物常常导致载体诱导的免疫抑制（等人，J..1985，135：2319）。因此，人们一直在寻找一种适合家畜、价格便宜并且能够刺激针对生长抑素的早期且有效的免疫反应的免疫增强剂。免疫增强剂反应避免了载体诱导的抑制。

影响生长抑素合成肽免疫原免疫原性的一个重要因素是它们通过 T 辅助细胞向免疫系统呈递表位。以前，这是通过载体蛋白提供的，但存在上述缺点。其还作为重组DNA表达系统的杂合多肽提供(Riggs，US 4,812,554；US 4,563,424；和Xu等人， China(B卷)，1994；37：1234)。它也可以通过含有目标半抗原 B 细胞位点和适合宿主的 T 辅助细胞表位 (Th) 的合成肽来更容易和方便地提供。除了抗体结合位点外，该肽还与辅助 T 细胞受体和 II 类 MHC 分子发生反应（等人，，1985，317：359），从而刺激对目标抗体结合位点（目标位点）的严格调节。位点特异性抗体反应。与载体缀合物和重组肽相比，全合成的生长抑素肽免疫原将具有以下优点：产品化学成分明确，易于质量控制，稳定，不需要繁琐的下游加工，不需要复杂的生产设备，产生的免疫反应是位点特异性的，从而避免了不良反应，例如表位抑制。

合成生长抑素免疫原的免疫原性可以通过以下方式进行优化：(1)允许生长抑素结合到所选择的混杂Th位点上，以便大多数群体对其产生反应； (2)让生长抑素与抑制素结合，通过组合化学形成功能增强的Th，为群体提供可变的免疫反应； (3)通过循环限制稳定生长抑素所需的构象特征。

被称为混杂 Th 的表位可诱导有效的 T 细胞帮助，并能够与本身免疫原性较差且不提供有效免疫原的 B 细胞表位结合。精心设计的混合 Th/B 细胞表位嵌合肽能够在表现出不同 MHC 单倍型的遗传多样性群体的大多数成员中诱导 Th 反应和随后的抗体反应。混合Th可以由源自有效免疫原的特定序列提供，包括麻疹病毒F蛋白和乙型肝炎病毒表面抗原。一些已知的混杂Th已被证明可有效增强肽，这些肽的免疫原性低于十肽激素LHRH（US 5,759,551）。

有效的 Th 表位长度范围为约 15 至 30 个氨基酸残基，通常具有共同的结构特征，并且可能包含特定的标签序列。例如，一个共同特征是存在两亲性分子螺旋，这是一种 α 螺旋结构，其中疏水性氨基酸残基占据螺旋的一侧，带电和极性残基占据周围的面（Cease 等人，） （美国国家科学院科学，1987，84：4249-4253）。 Th表位通常还包含其他主要氨基酸模式，例如Gly或带电残基，随后是两到三个疏水性残基，随后依次是带电或极性残基。这种模式称为序列。还发现Th表位一般遵循1、4、5、8规则，其中带正电荷的残基后面是第四、第五和第八位置的疏水性残基。因为所有这些结构均由共同的疏水性、带电性和极性氨基酸组成，所以每种结构可以同时存在于Th表位中(等人，J Gen Virol，1991，72：1293-99)。大多数（如果不是全部）混杂的 T 细胞表位至少包含上述周期性之一。这些特征可以插入到理想化人工 Th 位点的设计中，包括组合 Th 表位。关于组合Th位点的设计，提供了MHC结合基序的可变位置和优选氨基酸的列表（Cease等人，Proc Natl Acad，1987；84：4249-4253）；并且公开了一种用于制备结合Th的被称为构建的合成抗原文库或SSAL的文库肽的方法(Wang等人，WO 95/11998)。因此，1,4,5,8规则与组合MHC结合基序一起可以应用于SSAL可变和简并位点的位置排列以及这些位点残基的选择，以最大化对人工Th的免疫反应范围（ WO 95/11998)。

肽免疫原通常比蛋白质更灵活并且不容易保留任何优选的结构。因此，通过引入循环限制来稳定肽免疫原是有用的。正确环化的肽免疫原可以模拟并保留目标表位的构象，从而诱导与真实分子上的这些位点发生交叉反应的抗体（Moore，<合成肽 - 用户指南（肽 A 用户）> 第 2 章，编辑作者：Grant, WH 和：纽约，1992 年，第 63-67 页）。

使用前面讨论的肽技术和肽设计元素设计的肽免疫原，即混杂的有效Th表位、Th SSAL组合肽和循环约束的设计，是高效合成生长抑素免疫原的基础。该肽是通过优化定位和环化呈现生长抑素以及广泛反应性 Th 反应的首选肽。因此，已发现完整形式的生长促进剂仅含有 Th 表位或与一般免疫增强剂（例如感染素结构域 ( ) 和 12 聚体环中的功能位点组合）而不受干扰。具有生长抑素特定结构排列（作为靶位点）的肽可有效刺激抗生长抑素抗体的产生。

本发明的另一方面提供了含有免疫有效量的本发明的肽组合物和一种或多种药学上可接受的疫苗制剂以及剂量说明的抗原组合物，以产生针对靶标的免疫应答。针对生长抑素基因座的免疫治疗抗体。该肽组合物可用于改善畜牧场中的动物生长。

本发明的另一方面涉及通过在足以诱导针对所述生长抑素的功能性抗体的时间和条件下向哺乳动物施用一种或多种本发明的肽来增加哺乳动物循环系统中的生长。激素水平方法。

本发明的又一个方面涉及具有约30至约90个氨基酸的免疫合成肽，其含有辅助T细胞(Th)表位、生长抑素(SEQ ID NO：1)或抑制素的生长抑素肽类似物、分隔其的间隔区。免疫原性结构域，和任选的一般免疫刺激位点，例如感染素结构域(SEQ ID NO：2)。三个免疫原性结构域元件和肽的间隔区可以以任何顺序共价连接，只要肽半抗原的免疫反应性基本上保留或能够与生长抑素自肽产生免疫应答。发明详述本发明涉及用于产生生长抑素特异性的高效价多克隆抗体的新型肽组合物。肽组合物的高位点特异性减少了针对载体蛋白上不相关位点的抗体的产生。因此，本发明进一步涉及促进畜牧业动物生长的方法。

生长抑素(SEQ ID NO：1)是一种短环肽激素，其本身是非免疫原性的，特别是作为自身抗原时。可以通过将短肽化学偶联至载体蛋白（例如匙孔血蓝蛋白（KLH））或通过重组DNA表达将其融合至载体多肽（例如乙型肝炎表面抗原）来进行免疫。加强。这种“生长抑素载体”疫苗的主要缺点是结合形成的抗体大部分是针对载体蛋白或多肽的非功能性抗体，并且存在表位抑制的可能性。本发明的免疫原是完全合成的肽，其减少不相关抗体的产生，从而诱导更针对生长抑素的免疫应答。然而，由于生长抑素是一种非免疫原性T细胞依赖性抗原，其免疫原性完全依赖于外源性Th表位。与杂合Th表位共价连接的本发明的肽提供了该特征。本发明的免疫原都是位点特异性免疫应答，以便为牲畜提供​​有效的生长促进。

提供具体实例作为本发明肽的实施方案。这些例子提供了与生长抑素肽连接的合成免疫刺激元件，以在遗传多样性的宿主群体中产生有效的生长抑素反应性抗体。这些抗体随后导致生长抑素功能的抑制，从而有效促进牲畜的生长。

对于主动免疫，本文所用的术语“免疫原”是指能够诱导针对生长抑素的抗体，从而抑制哺乳动物中生长抑素水平的肽组合物。本发明的肽组合物包括含有混杂的辅助T细胞表位(Th表位)的肽。该肽通过间隔区(例如，Gly-Gly)共价连接至生长抑素肽，从而将其连接至目标生长抑素肽的N-或C-末端以诱导有效的抗体。回答。免疫原还可以包括一般免疫刺激元件，例如来自鼠疫耶尔森菌的元件(Brett等人，Eur.J..1993，23：1608-1614)(SEQ ID NO：2)感染素结构域。感染素结构域通过间隔区与 Th 肽结合。

本发明的肽可以由下式H2N-(A)n-(生长抑素肽)-(B)o-(Th)mX或H2N-(A)n-(Th)m-(B)表示o-(生长抑素)-X，其中H2N是肽缀合物的N端α-NH2，每个A独立地是氨基酸，或一般的免疫刺激肽；每个B选自氨基酸、-NHCH(X)-、-NHCH(X)(ε-N)Lys-、-NHCH(X)CH 2 S-琥珀酰亚胺基(ε-N)Lys-和-NHCH(X) CH2S-(琥珀酰亚氨基)-；每个Th独立地是含有辅助T细胞表位的氨基酸序列，或其免疫增强类似物或片段；生长抑素肽是生长抑素或其交叉反应性和免疫功能类似物； X是氨基酸的α-COOH或α-CONH2； n为1至约10； m为1至约4； o为0至约10。

本发明的肽免疫原包含约20至100个氨基酸残基，优选约25至约80个氨基酸残基，更优选约25至60个氨基酸残基。

如果A是氨基酸或一般免疫刺激元件，例如Inv，它可以共价连接至肽免疫原的N-末端(如通式中所示)或C-末端(未显示)。

如果A是氨基酸，它可以是任何天然或非天然氨基酸。非天然氨基酸包括但不限于D-氨基酸、β-丙氨酸、鸟氨酸、正亮氨酸、正缬氨酸、羟脯氨酸、甲状腺氨酸、γ-氨基丁酸、高丝氨酸、瓜氨酸等。天然氨基酸包括丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。此外，如果m大于1并且两个或三个A基团是氨基酸，则每个氨基酸可以独立地相同或不同。

如果A是感染素的结构域，则它可能是来自鼠疫耶尔森菌种的感染素蛋白的免疫刺激表位。这种免疫刺激特性是由于该感染素结构域能够与 T 细胞（特别是激活的免疫或记忆 T 细胞）上存在的 β1 整联蛋白分子相互作用。布雷特等人。描述了与 β1 整合素相互作用的感染素结构域的特定序列（欧洲免疫学杂志，1993；23：1608）。用于连接混杂Th表位的感染素结构域(Inv)的优选实施方案已在美国描述，其通过引用并入本文。 Inv结构域优选具有序列Thr-Ala-Lys-Ser-Lys-Lys-Phe-Pro-Ser-Tyr-Thr-Ala-Thr-Tyr-Gln-Phe(SEQ ID NO：2)或衍生自另一序列。鼠疫耶尔森氏菌感染蛋白相应区域的免疫刺激类似物。因此，此类类似物可以含有氨基酸残基的取代、缺失或插入以适应菌株变异，只要类似物保留免疫刺激特性。

在一个实施方案中，n是1并且A是α-NH 2 。在另一个实施方案中，n是4，A是α-NH 2 ，并且感染素结构域(Inv)、甘氨酸和甘氨酸以此顺序连接。

B为间隔区，为上述天然氨基酸或非天然氨基酸之一。每个B独立地相同或不同。 B氨基酸还可以在混杂的Th表位和生长抑素肽(例如SEQ ID NOS：1)或其交叉反应性和免疫功能类似物之间提供间隔区，例如Gly-Gly。除了将Th表位与B细胞表位，即生长抑素肽和免疫类似物物理分离外，Gly-Gly间隔区还破坏Th表位与生长抑素肽及其与免疫功能类似物结合而产生的所有人工二级结构，从而减弱 Th 和/或 B 细胞反应之间的干扰。 B 的氨基酸还可以形成间隔区，充当弹性铰链，增强 Th 和 IgE 结构域的分离。编码弹性铰链的序列的例子可见于免疫球蛋白重链铰链区。柔性铰链序列通常富含脯氨酸。一种特别有用的柔性铰链是序列Pro-Pro-Xaa-Pro-Xaa-Pro(SEQ ID NO：3)，其中Xaa是任何氨基酸，优选天冬氨酸。 B的氨基酸提供的构象间隔使得本发明的肽免疫原与适当的Th和B细胞之间能够更有效地相互作用，从而增强对Th表位和抗体诱导表位以及它们的交叉反应性和免疫功能的免疫应答的理解类似物。

Th是含有Th表位的氨基酸序列(天然或非天然氨基酸)。表位可以由连续或不连续的表位组成。因此，并非 Th 的每个氨基酸都必须是表位的一部分。因此，Th表位，包括Th表位的类似物和片段，能够增强或刺激对生长抑素肽及其免疫功能类似物的免疫应答。免疫结构域和混杂的 Th 表位似乎在具有广泛不同 MHC 类型的动物和人类中具有高度和广泛的反应性 (et al., 1991;)。本发明的肽的Th结构域具有约10至50个氨基酸，优选约10至30个氨基酸。当存在多个Th表位时(即，m≥2)，每个Th表位独立地相同或不同。 Th片段是足以增强或刺激对生长抑素肽(SEQ ID NO：1)及其免疫功能类似物的免疫应答的Th表位的连续部分。

本发明的表位包括源自外源病原体的Th，包括但不限于例如乙型肝炎表面抗原和核心抗原辅助T细胞表位(HBs Th和HBc Th)、百日咳毒素辅助T细胞表位(PT Th) 、破伤风毒素辅助 T 细胞表位 (TTTh)、麻疹病毒 F 蛋白辅助 T 细胞表位 (MVFTh)、沙眼衣原体主要外膜蛋白辅助 T 细胞表位 (CT Th)、白喉毒素辅助 T 细胞表位 (DT Th)、疟原虫恶性疟原虫环孢子菌辅助 T 细胞表位 (PF Th)、曼氏血吸虫磷酸三糖异构酶辅助 T 细胞表位 (SM Th) 和大肠杆菌 TraT 辅助 T 细胞表位 (TraT Th)。在本发明中选择作为混杂Th的代表性实例的源自病原体的Th在美国以SEQ ID NOS:2-9和42-52列出； CT Th P11 在 Stagg 等人，，1993，79：1-9 中列出； HBc 肽 50-69 列于 J. Clin 等人中。 1991，88：214-222，其通过引用并入本文。另外，Th表位包括理想化的人工Th(例如，SEQ ID NOS：14)和人工SSAL Th(例如，SEQ ID NOS：7、30、31)。包括SSAL Th在内的肽在固相肽合成中与生长抑素和其他序列顺序并同时合成。 Th 位点还包括功能性免疫类似物。免疫功能性Th类似物包括免疫增强类似物、交叉反应类似物以及任何这些Th表位的片段。功能性Th类似物还包括Th表位中1至10个氨基酸残基的保守取代、添加、缺失和插入，而基本上不改变Th表位的Th刺激功能。

本发明的合成肽如下式(A)n-(Th)m-(B)o-(生长抑素肽)或(A)n-(生长抑素肽)-(B)o-(Th) m 具有一个 Th 表位，通过间隔基 B 共价结合到生长抑素肽及其交叉反应和功能性免疫类似物的 N 或 C 末端。

根据本发明，生长抑素肽(例如SEQ ID NO：1)的交叉反应性和功能性免疫类似物还可包括1至约4个氨基酸残基的保守取代、添加、缺失或插入。肽类似物能够诱导与生长抑素肽交叉反应的免疫反应。保守取代、添加和插入可以使用本发明中定义的天然或非天然氨基酸来完成。

本发明优选的肽免疫原是含有生长抑素肽或其交叉反应性和功能性免疫类似物的那些；间隔基（例如，Gly-Gly）； TH表位，即HBs Th(SEQ ID NO:1_5)、HBc Th(SEQ ID NO:4)、MVF Th(SEQ ID NOS:21，29)、PT Th(SEQ ID NO:6)、TT Th( [0131] SEQ ID NO: 5)、CT Th(SEQ ID NO: 27)、DTTh(SEQ ID NO:28)、人工Th(例如SEQ ID NOS:7、14、30、31)或其类似物；和任选地，Inv结构域(SEQ ID NO：2)或其类似物。

含有本发明的肽免疫原和一种或多种Th表位的混合物的肽组合物可以增强更广泛群体中的免疫功效，从而产生针对生长抑素肽的改善的免疫应答。

本发明的肽免疫原可以通过本领域普通技术人员熟知的化学合成方法来制备。例如参见Grant，WH和Co.编辑的“A User's Guide to ”的第3章，纽约，1992年，第14页。 77. 因此，可以应用固相合成 - 自动匹配技术，用 t-Boc 或 Fmoc 化合物保护 α-NH2，并应用侧链保护的氨基酸，例如在 430A 型或 431 型 肽合成仪上（肽或431)来合成肽。含有 Th 表位的 SSAL 肽构建体可以通过提供用于结合特定可变位置的所选氨基酸的混合物来制备。

所需肽免疫原组装完成后，根据标准程序处理树脂，将肽从树脂上裂解下来，并解封闭氨基酸侧链上的官能团。通过HPLC纯化游离肽并通过例如氨基酸分析或测序进行生化表征。肽的纯化和表征方法是本领域技术人员众所周知的。

本发明的免疫原也可以是聚合的。这可以例如使用常规方法通过戊二醛和赖氨酸残基的-NH 2 之间的反应来实现。通过另一种方法，通过在合成的“A-Th-间隔子-（生长抑素肽）”或“（生长抑素肽）-间隔子-（Th）m-（A）n”N端添加额外的半胱氨酸免疫原，使合成的“A-Th-间隔子-(生长抑素肽)”或“(生长抑素肽)-间隔子-(Th)mA”免疫原聚合或共聚。本发明的免疫原还可以制备为支链的免疫原。通过在支链聚赖氨酰核心树脂上直接合成所需的肽结构来制备聚合物(Wang等人，，1991；254：285-288)。

或者，可以通过众所周知的重组DNA技术合成更长的合成肽免疫原。任何关于DNA技术的标准手册都提供了制备本发明的肽的详细方法。为了构建编码本发明的肽的基因，优选使用适用于要在其中表达该基因的生物体的优化密码子，将氨基酸序列反向翻译成核酸序列。接下来，通常通过合成编码肽和一些必要的调控元件的重叠寡核苷酸来制备合成基因。将合成的基因插入适当的克隆载体中，获得重组体并对其进行表征。然后在适合所选表达系统和宿主的适当条件下表达肽。使用标准方法对肽进行纯化和表征。

本发明的肽组合物的效果可以通过将含有本发明的肽例如SEQ IDNOS:8-13、16-20、22的免疫原性组合物注射到动物例如大鼠中来实现，然后监测对生长抑素及其功能性免疫类似物的交叉反应性和激素免疫反应的影响，如实施例中详述。

本发明的另一个方面提供了药物组合物，其在药学上可接受的递送系统中含有免疫有效量的一种或多种本发明的肽免疫原。因此，可以使用佐剂、药学上可接受的载体或其他疫苗组合物中提供的其他常规成分将本发明的肽配制成肽组合物。可用于本发明的佐剂或乳化剂包括明矾、不完全弗氏佐剂、皂苷、角鲨烯、L121、单磷脂酰脂质A(MPL)、二甲基双十八烷DDA、QS21、ISA51、ISA35和ISA 720，以及其他有效的助剂和乳化剂。此类制剂包括立即释放和/或持续释放制剂，以及诱导全身免疫的制剂，其可以例如通过用微粒封装免疫原或将免疫原与微粒共同施用来实现。本领域普通技术人员可以容易地确定此类制剂。本发明的免疫原可以通过任何常规途径施用，包括皮下、口服、肌内或其他肠胃外或肠内途径。同样，免疫原可以作为单剂量或多剂量施用。本领域普通技术人员可以容易地确定免疫方案。

本发明的肽组成含有有效量的本发明的一种或多种肽免疫原和药物可接受的载体。合适的剂型剂型中的组成通常含有约0.5μg至约1 mg的每公斤体重免疫原。如果多剂量给药，则可以方便地将其分为每个剂量单位制备的适当量。例如，初始剂量，例如0.2-2.5 mg；最好是通过注射（最好是肌肉内注射）来给予以本发明的肽组成代表的免疫原的1 mg，然后重复剂量（增强剂量）。剂量将基于患者的年龄，体重和一般健康状况，这在疫苗和治疗艺术中众所周知。

如O'Hagan等人所述，可以通过捕获或在可生物降解的微粒上捕获或递送合成生长抑素肽免疫的免疫反应。 （疫苗，1991; 9：768）。可以将免疫原封装到具有或没有佐剂的可生物降解的微粒中，以增强免疫反应，包括局部粘膜免疫，并提供针对口服给药的时间控制释放，以及用于给药的延迟或环状反应（O'Hagan等人，1991; HE。等人，1991年； 287-294）。

下面的示例中提供了特定的肽免疫原和成分，以说明本发明。这些示例仅是出于说明目的，并且不会以任何方式限制发明的范围。

示例1合成生长抑素肽构建体的一般方法。使用固相合成技术，在应用的生物系统自动匹配肽合成器（型号430、431和433A）上，FMOC化合物分别用于合成第2和3列。肽。可以通过提供所需的氨基酸混合物来制备包含构建体的合成抗原库（SSAL），以将化学耦合到设计中指定的特定位置，例如，称为“ 1,4”（SEQ ID NO：7）肽构建人造地点。组装所需肽后，应根据标准程序将树脂用三氟乙酸处理，以从树脂和氨基酸侧链上的保护基团裂解肽。对于环状肽，将切除的肽溶解在15％DMSO水溶液中48小时，以促进半胱氨酸之间链链二硫键的形成。

通过HPLC纯化切除的，提取和洗涤的肽，并以质谱和相反的相位HPLC为特征。

将肽代码柱中标记为“ B”的肽合成与所示的靶抗原肽合成，并顺序连接到TH位点。使用的位点包括，例如，来自乙型肝炎病毒的HBS TH（​​SEQ ID NO：15）和称为“ 1，4”的新的人工THET。标有“ C”的肽是与INV域免疫刺激肽依次合成的“ B”构建体的变体（SEQ ID NO：2）。标记为“ D”的肽是“ B”构建体的倒数（例如，生长抑素-th），标有“ E”的肽是“ C”构建体的倒数（例如，-th）。生长抑素-th-inv）。合成的“ B”，“ C”，“ D”和“ E”构建体具有一个胶合式的垫片，可将靶抗原位点与TH部位分开，并将TH和INV免疫刺激位点分开。

示例2评估生长抑素肽生长促进的免疫原性的一般方法按实验免疫方案和血清学分析指令进行了4或5只大鼠的组，以确定免疫原性。抑制蛋白肽免疫（例如，如表2和3所示，例如，SEQ ID NOS：8-13、16-20、22和24）。标准实验设计免疫原（1）个体肽免疫原；或（2）每个示例中指定的含有等摩尔肽免疫原的混合物。剂量：除非另有说明，否则每次免疫100μg。路由肌肉内，除非另有说明的佐剂（1）完整的佐剂（CFA）/不完整的辅助（IFA）；或（2）0.4％明矾（氢氧化铝）； CFA/IFA组在第0周接受CFA和IFA在接下来的几周内接受IFA。明矾组在所有剂量上都接受了相同的配方。给药时间表为0、2和4周； 0、3和6周，或其他指示。血液收集时间表为0、3、6和8周，或其他说明。动物种类 - 每组4或5只大鼠/组分析的动物数量特异性ELISA针对每种免疫血清的抗肽活性，固相底物被环环（SEQ ID NO：1）循环。

收集血液，加工成血清，并用靶抗原肽来确定ELISA的滴度。

通过ELISA（酶联免疫吸附测定法）在96孔平底的微量滴定板上确定抗阳性骨骼抑制，以前涂有环化的生长抑素肽（SEQ ID NO：1）作为蛋白质抗体的免疫吸收活性。将等分试样（100μL）在5μg/ml浓度下以37°C孵育1小时。将3％明胶/PBS溶液添加到肽涂层的井中，在37°C再次孵育1小时，然后密封板。然后将封闭板干燥并用于分析。从样品稀释缓冲液中的1：100稀释开始，将等分试样（100μL）的实验性免疫血清连续稀释，并添加到肽涂层的板上。将板在37°C下孵育1小时。

用0.05％PBS/TWEEN（R）冲洗板6次。在结合稀释缓冲液（含有0.5 M NaCl和正常山羊血清）中适当稀释的100μl辣根过氧化物酶标记的山羊特异性抗体适当稀释。将板在37°C下孵育1小时，然后像上述一样冲洗。然后加入一个等分试样（100μL）的M-苯基二胺底物溶液。颜色反应进行5-15分钟，然后添加50μl2n H2SO4以终止酶的颜色反应。确定板读取器上每个孔的内容。根据吸光度的线性回归分析，计算ELISA滴度，并将截止点定为0.5。削减值是精确的，因为每个分析和处理的稀释稀释值小于0.15。

基于肽的ELISA。基本上按照本发明ELISA的描述，基于ELISA的ELISA进行。除了抗原涂料步骤外，从其相应的冠状抑制性疫苗构建中指定了微滴剂片剂（例如，例如，例如，例如，例如，例如，，例如， ，例如，例如，例如，例如，例如，例如，例如，例如例如，例如，例如，例如，例如，例如，例如，例如例如。

示例3组合具有免疫原性研究的免疫蛋白抑制性抗原肽的各种免疫刺激成分，表2中显示了本发明的肽的影响（a）n-（a）m-（b）m-（b（b）m-（b（b）， ）o-（促进VIMIN抑制肽）或（a）N-（促进抑制肽） - （b）o-（th）m，其中A是一个是一种特异性酸，α-NH2或INV（SEQ ID）否：2）;当A是氨基酸或INV时，它可以连接到N或C端的任何端。外源发病机理的辅助T细胞表面，例如HBC50-69TH（SEQ ID NO：4），TT615-631TH（SEQ ID NO：5），PT147-176TH（例如，SEQID NO：6）或人工TH ，1、4、9（seq idno：7）; n为1，m是1，o是2。

这些肽与其他肽合成，免疫血清产生用于免疫原性评估。表2表2中TH表位置的集成整合是一种特定的抗体特异性抗体，可促进中的高效价格。相比之下，没有含有轴轴抑制性肽（，SEQ ID NO：1）没有免疫原性。但是，与其他TH相比，有些是首选。例如，在表2中（SEQ ID NO：8）带有HBC TH（SEQ ID NO：4）和SYNTH（1，2，3）（SEQ ID NO：20）（SEQ ID NO：14），人造TH站点和PT149-167TH（SEQ ID NO：6）（SEQ ID NO：10）比较原始，最好是CTA8 TH（SEQ ID NO：23）几乎不能免疫原始（SEQ ID）否：24）。此外，为了优化免疫原性，必须具体特定于TH部位的连接方向和促进维生素抑制靶位部位。比较（SEQ ID NO：11）和（SEQ ID NO：12）抗体响应动力学。在启动子的C端的C端，首选1、4，TH（SEQ ID NO：7）。根据（SEQ ID NO：16）和（SEQ ID NO：22）的比较，-277的更好位置（SEQ ID NO：21）是促进促进抑制的N末端。显然，每个位点的选择和排列必须针对本发明的肽最好。

对于表3所示的促进抑制肽，已经发现促进含有混合表的抑制构建体具有免疫原性，并且组合了INV和“ TH”。肽的免疫。 （SEQ ID NO：16）和（SEQ ID NO：17）比较（SEQ ID NO：16）和（SEQID NO：19）指示添加Inv域（SEQ IDNO：2）以构建N端人体改善了动物反应百分比的免疫原性，促进维生素特异性抗体的促进以及抗体反应的持续时间（> 35周）。但是，（SEQ ID NO：8）和（SEQID NO：25）和（SEQ ID NO：26）与（SEQ ID NO：26）合并。与特定位点结合后，INV可能没有免疫刺激作用。对于N端（SEQ ID NO：4）上的特定方向，更优选地与HBCTH位点结合（SEQ ID NO：4）。对于（SEQ ID NO：13）的示例，INV和TT615-631TH（SEQ ID NO：5）的组合在C-END末尾产生有效的免疫原件。因此，额外的INV和INV的方向特定于本发明的首选肽。

对于具有强效应点为导向的免疫原性的促进维生素抑制构建体，对于免疫刺激成分，例如表3的表3（SEQ ID NO：17）的Inv-277th和（Seq ID NO：18）（SEQ）（SEQ） ID编号：17）KKK-HBS19-32-GG，与抗纤维蛋白> 3 log10的抗体抑制性抗体成本相比，抗体的成本<1 log10。因此，本发明的合成肽产生的免疫反应几乎专门指向促进的目标部位。

示例4本发明的其他抗原肽合成了由本发明转化并产生免疫血清的肽的肽抗原抗原实例。

（a）n-（th）m-（b）o-（促进弹性蛋白抑制剂）或（a）n-（a）n-（促进弹性蛋白抑制剂） - （b）o-（b）o-（th）m之一T细胞从外源发病机理中放置；或表5所示的人造表的辅助T细胞表面； A是氨基酸，α-NH2，α-NH2或INV（SEQ ID NO：2）；当A是氨基酸或INV时，它可以连接到N端或C端的任何端。 2.

表1用于促进生长。

携带蛋白促进维生素抑制性结合用作疫苗接种的疫苗。

表2整合了各种TH促进的对抑制素抗原肽的免疫原性

a促进echin的序列是收集的反应性动物收集的血清的实验结果。

表3基于促进聚合水抑制性抗原肽的免疫原性的改善

表3（延续）

a binv（seq.ID No.1）binv（seq.ID 2）b binv（seq.id no.2）的序列促进了ELISA反应收集的血清的实验结果动物。

表4病原体源的TH表面位置的氨基酸序列

表5人造表面位置的氨基酸序列

序列清单（1）一般信息（ⅰ）申请人Inc.等。

（ⅱ）发明名称用于促进动物牧场生长的生长。 （d）国家纽约州（e）美国国家（F）邮政编码10154-0054（ⅴ）计算机阅读表格（a）媒体类型软磁盘（b）计算机IBM PC兼容机器（C）操作系统PC-DOS/MS-- DOS（d）软件＃1.0，​​＃1.25（ⅵ）申请数据首先（a）申请号09/100,415（b）应用程序日期1998年6月20日（c）分类编号（ⅶ）当前应用程序数据（a）应用程序编号TBA （b）申请日期1999年6月21日（c）分类编号（ⅷ）律师/代理信息（a）名称玛丽亚·奇林（Maria Chlin）

（b）注册编号29,323（c）参考/案例情人No. 1151-（ⅸ）电信（a）Tel-758-4800（b）传真212-751-6849（2） ）串行特征（a）长度14氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑结构（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列的线性描述SEQ ID NO：1：Ala Gly gly cys lys lys lys lys lys asn asn phe phe phe phe phe phe phe phe PHR PHR PHR1 5 10SER CYS（2）SEQ ID NO NO：2（ⅰ）序列特征（a）长度16氨基酸（B）型氨基酸（d）局部结构线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID NO：2：2：2：THR ALA LYS Ser Lys Lys phe pro ser thr ala1 5 10thr tyr phe15（2）seq ID no：3的信息（a）序列特征（a）长度（a）长度6氨基酸（b）类型氨基酸（d）拓扑结构线性（ⅱ）Seq ID NO：3：Pro XAA Pro XAA Pro1 5（2）SEQ ID NO：4信息（4）序列特征（a）长度20氨基酸（B ）类型氨基酸（b）d）拓扑（）分子型肽（ⅹ）序列描述SEQ ID编号：4：Ser asp phe Pro服务：5信息（ⅰ）序列特征（a）长度17氨基酸， （b）类型氨基酸（d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID NO：5：TRP VALG ASP ASP ASP ASP ASP PHE THE ASN ASN ASN GLU1 5 10SER SER SER GLN LYS LYS LYS THR15（2）SEQ ID NO NO ：6序列特征（a）长度30氨基酸（b）型氨基酸（d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅱ）分子型（ⅱ）分子型（ⅱ）分子型（描）序列描述SEQ ID NO：6：LYS LYS LYS leu arg leu leu leu tyr met ile met1 5 10ser gly leu ala val arg al arn al il val lys lys lys ly tyr tyr tyr tyr25 30（2）seq id no：7信息（7）序列特征（a）长度（a）长度15氨基酸（b）类型氨基酸（d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅸ）特征（a）名称/关键字修饰位置（b）位置1（b）位置1（b）（b）（b）位置1（b）d）其他信息/注意=信息= ile，met或leu''（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置2（d）其他信息/note =''seer或thr''（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置4（d）其他信息/note =“ IE或arg”（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置（b）位置5（d）位置5（d）其他信息/注意= s lys或thr''（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置10（d）其他信息/note/note =''或thr''（ⅸ）特征（a）名称（a）名称/名称/关键字修改位置

（b）位置11（d）其他信息/note =''lys或arg'（ⅸ）功能（a）名称/关键字扣除点（b）位置12（d）其他信息/note/note ='' ⅸ（性）特征（a）名称/关键字修改位置点（b）位置14（d）其他信息/note =''gly或thr''（ⅸ）特征（a）名称/关键字点（b）位置15（b）位置15（b） d）其他信息/note =“ ie，met或value（ⅹⅰ）序列描述SEQ ID编号：7：XAA XAA GLU XAA XAA XAA XAA GLY VAL ILE VAL XAA XAA XAA1 5 10GLU XAA15（2） ⅰ）序列特征（a）长度36氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑结构线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID NO：8：SER ASP PHE PRE SER ARG ARG ARG asp asp leu leu asp1 5 10th ala serg glu glu glu gly gly gly15 20cys lys asn phe phrs phrs thr ser ser ser ser ser ser ser ser cys25 35（2）seq ID信息（ⅰ）序列特征（ⅰ）序列（ⅰ）序列特征（）酸（d）拓扑结构（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列的线性描述SEQ ID NO：9：TRP Val arg asp ile Ile Ile Ile Ile Ile Ile Ile Ile Ile Ile Ile asp phr asn Glu1 5 10ser gln lys gln lys th gly gly gly gly gly ala gly ala gly ala gly ala gly ala gly cys 20phe 20phe phe trp lys thr phe thr序列信息（2）SEQ ID编号：10（ⅰ）序列特征（a）长度46氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑线性

（ⅱ）分子型肽（ⅹ）序列描述SEQ ID编号：10：Lys Leu arg leu arg leu tyr met ile ty ile met1 5 10ser al His val serg serg serg serg serg serg serg lysr tyr tyr tyr tyr tyr tyr tyr asp gly asp gly asp gly asp gly ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala ala gly ala gly ala phe trp lys thr phe thr ser cys40 45（2）seq ID号：11的信息（a）序列特征（a）长度31氨基酸（b）类型氨基酸（d）拓扑结构线性（d）拓扑结构线性（ⅱ）分子型肽（特）特征（a）名称/关键字修改位置点（b）位置1（d）其他信息/note ='ie，met或leu''（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改siter（b）位置2（d）其他信息/note =“ ser或thr”（ⅸ）功能（a）名称/关键字装饰位置点（b）位置4

（d）其他信息/note =''ile或arg'（ⅸ）功能（a）名称/关键字扣除点（b）位置5（d）其他信息/note =''lys或thr''（ⅸ）功能（ⅸ）功能（ⅸ）功能（ⅸ）a）名称/关键字修改位置点（b）位置10（d）其他信息/note =''his或thr''（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改器点点（b）位置11（d）其他信息/note = s lys或arg''（ⅸ）特征（a）名称/关键字扣除点（b）位置12（d）其他信息/note ='ie，met或leu'（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置14（d）其他信息/note =“ gly或thr”（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置15（d）其他信息/ note =，ile，met或val''（ⅹ）序列说明SEQ ID编号：11：XAA XAA XAA GLU XAA GLY VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL XAA XAA1 5 10GLU XAA GLY GLY GLY GLY GLY GLY GLY CYS LYS LYS LYS LYS LYS LYS LYS LYS LYS LYS LYS LYS LYS LYS ASN ASN PHE PHE PHE PHE PHE PHE PHE15 20 20 20 20 20s trp lys thr phe thr ser cys25 30（2）Seq ID编号：12（ⅰ）序列特征（a）长度31氨基酸（b）氨基酸型（d）拓扑（d）拓扑线性（d）分子类型肽（ⅸ）特征（a）名称/名称/关键字修改位置（b）位置17（d）其他信息/ note =''ile，met或leu''（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b ）位置18（d）其他信息/note =或ser或thr''（a）功能（a）名称/关键字扣除点（b）位置21（d）其他信息/note/note =“ ie或arg”（ⅸ）功能（a）名称/关键字装饰网站（b）位置22（d）其他信息/note =“ lys或thr”（ⅸ）功能

（a）名称/关键字修改位置点（b）位置26（d）其他信息/note =''或thr''（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置（b）位置27（d）位置27（d）位置27（d） d）其他信息/note = s lys或arg''（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置28（d）其他信息/note =''ie，met或leu''（ⅸ）功能（ a））名称/关键字修改位置点（b）位置30（d）其他信息/note =“ gly或thr”'（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置31（d）其他信息/Note = ″ ILE, MET or Val ″ (ⅹ Ⅰ) SEQ ID NO: 12: Ala Gly Cys Lys asn PHE PHE PHE THR PHR PHR PHR1 5 10SER CYS GLY GLY XAA GLU ILE XAA Val Ile15 20val XA a xaa xaa有关GLU XAA XAA25 30（2）SEQ ID编号：13的信息

（ⅰ）序列特征（a）长度51氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列序列描述SEQ ID NO：13：ala gly cys lysn phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe thr phe thr1 5 10ser cys gle gle gle ar ar ar asp ile ile as aile asp15 20phe thr asn gln lys thr gly gly gly thr25 35ala lys pro pro ser pro ser thr ala ala ala ala ala ala ln phe50（2） ）长度18氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑（）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID NO：14：LYS LYS LYS ile ile thr arg thr arg thr1 5 10ile thr1 Thr thr th th th th asp15（2）SEQ ID NO：15信息（a）长度15氨基酸（b）型氨基酸（d）线性（D）线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹⅰⅰⅰⅰⅹⅹⅹ ⅹ）序列描述SEQ ID编号：15：Phe Phe Leu Leu thr arg ileu pro pro gln1 5 10ser leu asp15（2）seq id no：16序列特征（a）长度（a）长度36氨基酸（b）型氨基酸（b）型氨基酸（ d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID编号：16：Gly Ile Leu serg serg serg gly ily lys ala ala ala ara ala ara ara ara ara ara ara gly1 5 10th PHR Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser 35 35 (2) SEQ ID NO: (A) 38 amino acid (B) type amino acid (d) ( ⅱ）分子类型类型的SEQ ID编号编号：17：Thr ala lys ser lys phe pro ser pro ser pro ser pro ser tyr ala1 5 10thr gln phe gln phe gel leu serg serg serg gly ile15 20la他的val asp thr asp thr gr lu lu ser thr25 30 35 30 35格利（2）信息SEQ ID号：18（ⅰ）序列特征（a）长度20氨基酸（b）型氨基酸（d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列序列描述SEQ ID NO：18：LYS LYS LYS LYS LYS PHE phe phe phe leu thr arg ile leu thr1 5 10ile pro gln sero asp gly gly gly gly15 20（2）seq id no：19序列特征（a）长度38氨基酸（b）型氨基酸（b）型氨基酸（b）氨基酸（b） ）d）拓扑结构线性（ⅱ）分子类型肽（ⅹⅰ）序列描述seq ID编号：19：thr ala lys ser lys lys lys phe pro ser pro ser thr ala1 5 10thr tyr phe gln phe phe gly gly lys lys lys lys lys lys lys lys lys phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe leu15 thr thr thr arg ile leu pro gln ser leu asp25 30 35格利（2）seq id no：20序列特征（a）长度34氨基酸（b）型氨基酸型（d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅹ）序列描述SEQ ID编号：20：Lys Lys Ile ile th th thr ar ar ar ar ar ar ar ar ar ar ar thr1 thr1 5 10ile th th th th th th thr asp asp gly gly gly gly cys lys15 20asn phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr phr ：21信息（ⅰ）序列特征（a）长度20氨基酸（b）型氨基酸（d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID编号：21：Gly Ile Leu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu serg gly ily lys ala ala arg ile1 5 10th他的val asp thr glu ser tyr15 20（2）seq id no：22序列特征（a）长度36氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑线性线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID编号：22：ala gly cys lysn phe phe phe phe thr phr phr phr1 5 10ser cys cys gly gly gly gly gly ile leu serg leu serg serg serg serg ile15 20la 20la arg gla arg Ile t v al asp th v al asp th v al asp thr asp thr asp th v al asp thr ser tyr25 30 35（2）信息（ⅰ）序列特征（a）长度25氨基酸（d）型氨基酸（d）拓扑切开术（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列序列描述SEQ ID NO：23：ALA LEU ASN ILEIE trp asp arg phe asp val phe ser1 5 10th leu gly ala thr serul serul leu （2）seq id no：24序列特征（a）长度41 41 41氨基酸（b）氨基酸（d）拓扑结构（d） ）分子型肽

（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID编号：24：Ala Leu asn Ile trp arg arg phe asp al asp val phe ser1 5 10th leu gly ala th ly ly ly ly ly ly ly ly ly ly ly ly ly ly 20ser gly cys lys lys lys lys asn asn phe p he trp lys25 30 35thr phr ser cys40（ 2）信息（ⅰ）序列特征（a）长度54个氨基酸（b）型氨基酸（d）线性（ⅱ）线性（ⅱ）线性（ⅱ）序列描述SEQ ID NO：25：THR ALA LYS LYS SER LYS LYS LYS LYS LYS LYS PHE PR PRO ser pro pro ser pro Tyr ala1 5 10thr gln phly phly ge phe pro pro ser15 20val arg asp leu asp thr ala leu thr ala leu tyr25 35arg glu glu glu glu glu gly ala gly gly gly cys lys asn asn phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe th thr phe thr thr phe thr ser cys thr ser cys50 no：26

（ⅰ）序列特征（a）长度54氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列序列描述SEQ ID NO：26：ala gly cys lysn phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe phe thr phe thr1 5 10ser cys gle gle phe pro pro pro pro pro 20 ass leu asp thr ala leu thr ala arg glu25 30 35gly thr lysr lys pro ser ser tyr40 ala thr thr tyr tyr tyr gln thr tyr gln phe50（2） （a）长度12氨基酸（b）型氨基酸（d）局部结构线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID NO：27：THR ILE aSn asn lys pro lys pro lys pro lys gly tyr val gly val gly lys glu1 5 10（2）SEQ ID编号：28（ⅰ）序列特征（a）长度22氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID NO： 28：asp ser glu th ala asn leu glu lys thr val1 5 10ala ala ala leu serle leu leu gly他的gly15 20（2）seq id no：29序列特征（a）长度长度长度15氨基酸（b）型氨基酸（d） ）拓扑结构线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID编号：29：Leu ser glu ile lys lys gly val His arg leu1 5 10glu gly val15（2）特征（a）长度15氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑（ⅱ）分子型肽（ⅸ）特征（a）名称/关键字修饰位置（b）位置2（d）其他信息/注意=“ ser或thr”（ⅸ）特征（a）名称/关键字修改位置点（b）位置5（d）其他信息/note/note =“ lys或arg''（ⅸⅸ（ⅸ）功能（a）名称/关键字装饰点（b）位置6（d）其他信息/note =“ gly或thr”（ⅸ）特征（a）名称/关键字修改位置（b）位置10（b）位置10（b）位置10（b）位置10（d）其他信息/note =信息=信息= thr''（ⅸ）特征（a）名称/关键字扣除点（b）位置11（d）其他信息/note ='lys或arg''

（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置14（d）其他信息/note =“ gly或thr'''（ⅹⅹ） VAL XAA XAA ILE1 5 10GLU XAA ILE15（2）SEQ ID NO：31信息（ⅰ）序列特征（a）长度19氨基酸（b）氨基酸型（d）线性（d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅸ）特征（ⅸ）特征（ a）名称/关键字扣除点（b）位置4（d）其他信息/note =''ser或thr''（ⅸ）功能（a）名称/关键字扣除点（b）位置7（d）其他信息/注释= y lys或arg'（ⅸ）特征（a）名称/关键字扣除点（b）位置8（d）其他信息/note =“ gly或thr”''

（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置12（d）其他信息/note =''或thr''（ⅸ）特征（a）名称/关键字扣除点（b）位置13（d） ）其他信息/note =“ lys或arg”（ⅸ）功能（a）名称/关键字修改位置点（b）位置16（d）其他信息/note =“ gly或thr”或thr''（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID No：31：Ile Serle Xaa glu ile Xaa val Ile XAA11 5 10XAA ILE GLU XAA ILE LEU PHE15（2）SEQ ID NO NO：32序列特征（A）长度17氨基酸（B））型氨基酸（D）氨基酸（D）拓扑结构线性（ⅱ）分子型肽（ⅹ）序列描述SEQ ID NO：32LYS LYS lys gln py lysn ser lysn ser lys lys phe ile1 5 10 gly ile thr glu leu15（2） ）长度22氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID NO：33：LYS LYS PHE ASN PHR PHR PHE TRP LEU1 5 10ARG VAL PO lys lys lys lys lys lys lys lys lys lys lys iD： Val Sera His Leu15 20（2）Seq ID NO：34信息（ⅰ）序列特征（a）长度27氨基酸（b）型氨基酸（d）拓扑（ⅱ）分子型肽（ⅰ）序列序列的线性（d）线性序列描述SEQ SEQ ID No：34：Tyr Asp Pro ASN Tyr Leu arg thr asp lys1 5 10asp arg phe phe leu gln th th th th th th th th th th th th th th th thr 20arg ile lys25（2） ）类型氨基酸（d）拓扑（ⅱ）分子型肽（ⅹ）序列描述SEQ ID NO：35：Gly ala ala ara ara arg cys pro asn gle asn gle Ara1 5 10leu thr ala ala ala ala ala ala ala glu leu arg gly gly ASN Ala Glu Leu15 20（2）SEQ ID NO：36的信息（a）序列特征（a）长度21氨基酸（b）类型氨基酸（d）拓扑结构线性（d）拓扑结构线性（ⅱ）分子型肽的序列（ⅹ）序列描述SEQ ID编号：36：Val ser phe gly val trp ile arg thr pro ala1 5 10tyr arg pro pro pro ala pro ala pro ile leu15 20（2）seq id no：37（37（ⅰ）序列特征（a）长度20氨基酸（b）类型氨基酸（d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID NO：37：Pro His Thr ala ala ala ala ala gln ala ala Ile leu cys1 5 10trp gly glu glu leu leu leu ala ala15 20（ 2）SEQ ID号：38信息（ⅰ）序列特征（a）长度19氨基酸（b）型氨基酸（d）线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹⅰⅰ））序列序列描述SEQ ID：38 ：arg ala ala gly gly ala ila leu his ile pro thr arg1 5 10ile arg gln gln gln gly leu glu glu arg15（2）seq id no：39序列特征（a）长度21氨基酸（b）氨基酸类型（d）氨基酸（d）拓扑结构（ⅱ）分子型肽（ⅹⅰ）序列描述SEQ ID编号：39：Ala Val ala ala ala ala ala ala glu glu thr arg glu glu val ile glu val1 5 10leu gln arg ala ala ala ala ile leu15 20（2） ⅰ）序列特征（a）长度39氨基酸（b）型氨基酸（d）局部结构线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID NO：40：40：GLU GLU ILA ALA GLN ALA GLN SERLE Ala Leu Ser1 5 10Leu Met ala ala gln ala leu val gly gly glu15 20leu val asle asle gly phe ala asn phe phe val25 35glu ser（2）seer（2）seer q id n o：41信息：41个信息（41个信息（41）序列（ⅰ） b）类型氨基酸（d）拓扑（）分子型肽（ⅹ）序列描述SEQ ID NO：41：ASP ILE GLU LYS LYS MET MET GLU LYS ALA1 5 10SER VAL ASN VAL VAL VAL ASN SER15 20（ 2）SEQ ID NO：42序列特征（a）长度17氨基酸（b）型氨基酸（d）线性（ⅱ）Seq ID NO NO NO：42：LYS TRP trp phe lys phe lys thr asn ala pro ash gly gly gly ha gy gly a id seq ID NO：42 Val Val Val Val Val Val Asp1 5 10Glu Lys Ile15（2）SEQ ID NO：43序列特征（a）长度14氨基酸（B）型氨基酸（D）拓扑（d）拓扑线性（ⅱ）分子型肽（ⅹⅹ）序列描述SEQ ID no: 43: Gly Leu Gln Gly Lys Ile Ala Val Lys Ala1 5 10LYS GLY (2) SEQ ID NO : 44 (Ⅰ) (a) 19 amino acids (b) type amino acid (d) (Ⅱ) type (ⅹ Ⅰ) SEQID NO: 44: Gly Leu Ala Gly Leu value Met Ala Ala ASP1 5 10ALA MET VAL GLU ASP Val Asn15 (2) SEQ ID NO: 45 (A) 20 amino acids (b) Type amino acid (d) (Ⅱ) type (Ⅹ Ⅰ) SEQ ID NO: 45: Ser THR GLU ThR GLY Asn Gln His His Tyr Gln Thr1 5 10ARG VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL VAL

索赔

1. A T cell (TH) that - or its cross - and .

2． The of claim 1, the H2N- (A) n- ( )-(B) O- (TH) MX or H2N- (A) n -(TH) M- (B) O- ( ) -X, where H2N is the N- α-NH2 of the , and each A is of an amino acid or a ; each B is from amino acids, -NHCH (x)-, -nhch (x) (ε-n) LYS-, -nhch (x) CH2S- (ε-n) LYS-, and- NHCH (X) CH2S- ()-; TH is an amino acid T cell or its or ; Its cross- and ; X is an amino acid α-CoOH or α-CONH2; n is 1 to about 10; m is 1 to about 4; and O is 0 to about 10.

3. The of the claim 1, the is by the H2N- ( )-(B) O- (TH) m- (A) nx or H2N- (Th) m -(B) O- ( )-(A) NX where H2N is the N- α-NH2 of the , and each A is of an amino acid or a ; Each B is from amino acids, -NHCH (x)-, -nhch (x) (ε-n) LYS-,-NHCH (x) CH2S- (ε-n) LYS-, and -NHCH (and -NHCH ( X) CH2S- ( )-; TH is an amino acid or its or an T cell ; and ; x is an amino acid α-CoOH or α-CONH2; n is 1 to about 10; m is 1 to about 4; and O is about 0 to about 10.

4. Plane with 2 or 3 are from amino acids or non - amino acids.

5. The of one of the claim 1-4, the of the of the is the of the vivo.

6. Plane , one of the 1-4, where the TH is a SSAL table.

7. Plane , one of the claim 1-4, this is from SEQ IDNO: 4, EQ ID NO: 5, SEQID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 14, SEQID NO: 15. SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 27, SEQ IDNO: 28, and SEQ ID NO: 29 SEQ ID NO: 30, and SEQ ID NO: 31 amino acid .

8. The of claim 2, the is from SEQ IDNO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO:: 13. SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 24, SEQ IDNO: 25, SEQ and SEQ Id no: 26 amino acid .

9. Plane with 2 or 3, at least one A is an .

10． The of the claim 2, where n is 3, (a) 3 is (agent ) -gly-Gly.

11. Plane with 9 or 10 9 or 10, where the have an amino acid of SEQ ID NO: 2.

12. A with about 25 to about 90 amino acids the amino acid (A) a kind of , (b) an T cell (TH) table, and (C) to or cross - and .

13． A an amino acid that is from SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 19 and SEQ ID NO: 25.

14． Plane or of one to 13 of 1 to 13, the to to vibin .