高效液相色谱法分析硫酸庆大霉素注射液C组分条件的选择.doc

高效液相色谱法分析硫酸庆大霉素注射液组分C的条件选择 [摘要] 高效液相色谱法分析硫酸庆大霉素注射液组分C的各种因素的影响，如色谱柱、流量配比等。基于上述研究，建立了甲醇：水：甲酸（70：25：5）的流动相体系。样品分析可在16分钟内完成，c1峰与相邻杂质峰分离良好。 [关键词] 高效液相色谱法硫酸庆大霉素甲酸硫酸庆大霉素是一种多组分氨基糖苷类抗生素。四个主要成分是 c1、c1a、c2a 和 c2。每种成分都有不同的生物学特性。活性，各国药典均采用高效液相色谱法测定硫酸庆大霉素注射液中组分C的相对比例[1]。高效液相色谱法测定硫酸庆大霉素注射液组分c的难点在于c1峰与大量其他杂质峰重叠，影响组分测定的准确性。分析了各国现行药典中硫酸庆大霉素组分C的高效液相色谱方法，考察了不同类型色谱柱、流动相中醇水比例、甲酸的使用等对硫酸庆大霉素组分C的影响。代替冰醋酸，以及对硫酸庆大霉素的不同预处理方法。为了确定霉素c组分保留行为的影响，建立了甲醇:水:甲酸(70:25:5)流动相体系，成功测定了硫酸庆大霉素注射液的c组分，并从其中分离出了c1峰。杂质峰。好的。该方法适用于硫酸庆大霉素注射液的质量控制，为提高庆大霉素产品质量提供依据。 1 实验方法 1.1 药品和试剂硫酸庆大霉素标准品（中国药品生物制品检定所）、硫酸庆大霉素（东北制药厂）、硫酸庆大霉素注射液（市售）、巯基乙酸、异丙醇、冰醋酸、甲酸酸、甲醇均为色谱纯。

1.2高效液相色谱系统型式高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱柱：（250mm×4.6mm），流速：1.0ml/min，波长：330nm，进样量：10ul。方法1.3以甲醇:水:甲酸(70:25:5)为流动相。色谱分离后，采用归一化法计算各组分的百分比。 2 结果与讨论 2.1 不同色谱柱的影响。采用甲醇:水:甲酸(70:25:5)为流动相，流速1.0ml/min，测定了3个不同厂家的色谱柱对硫酸庆大霉素c组分的保留情况。行为影响。色谱柱对庆大霉素c组分的分离效果相同，但柱的保留时间最合适。可见采用较为理想。 2.2 流动相醇水比的影响硫酸庆大霉素c组分对流动相醇水比非常敏感。降低甲醇浓度可以使c1峰与相邻峰更好地分离，但分离时间较长。随着甲醇浓度的增加，分析周期缩短，但 c1 峰与相邻峰重叠。相对保留时间以甲醇：水：甲酸（70：25：5）为最佳[2]，分析周期合适。 2.3 流动相中冰醋酸的影响。受到降低流动相中甲醇比例有利于c1峰与相邻峰分离的启发，将冰醋酸改为甲酸，以增加流动相的极性，达到预期的分离效果。在甲醇:水比例不变的前提下，将冰醋酸改为甲酸，c1峰可以与相邻峰完全分离，重现性好，结果更准确。

3 小结以甲醇:水:甲酸(70:25:5)为流动相体系。测定硫酸庆大霉素注射液样品中c组分的相对比例时，可将c1峰与其相邻峰分开，将c1峰与其相邻峰分开。分析时间适宜，16分钟内即可完成样品分析，重现性好，结果准确可靠，为硫酸庆大霉素注射液的质量控制和质量标准的完善提供了新的依据。参考文献[1]胡长勤等：高效液相色谱流动相对庆大霉素c组分保留行为的影响。中国抗生素杂志1994：19(1)：21～24。 [2]中国药典庆大霉素HPLC分析成分条件系统研究1995；第 2 部分：905。